中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2014年
9期
6-9
,共4页
孔祥铨%贾志强%孟凡磊%韩秀斌%衣服新
孔祥銓%賈誌彊%孟凡磊%韓秀斌%衣服新
공상전%가지강%맹범뢰%한수빈%의복신
siRNA%BDNF%U251%凋亡
siRNA%BDNF%U251%凋亡
siRNA%BDNF%U251%조망
siRNA%BDNF%U251%apoptosis
目的 应用特异性脑源性神经营养因子-小干扰核糖核酸(brain derived neurotrophic factor-small interfering RNA,BDNF-siRNA)下调U251细胞中BDNF表达,观察对胶质瘤细胞凋亡的影响,并初步探讨其相关机制.方法 将经体外培养的人胶质瘤细胞系U251细胞随机分为3组,其中A组为对照组,B组为non-silencing-siRNA组,C组为BDNF-siRNA组.通过Western blot法检测细胞BDNF、AKt、pAKt蛋白的表达,ELISA检测各组BDNF的分泌水平,流式细胞仪法检测各组U251细胞凋亡情况.结果 Western blot结果显示:与A组和B组相比,C组BDNF、pAKt蛋白表达显著降低(P＜0.05).ELISA结果表明C组U251细胞培养上清中BDNF含量为(70.20±3.05) pg/mL,与A相比有所降低,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测结果可见C组细胞的凋亡率为(19.62±2.50)％,显著高于A组[(1.63±0.61)％]和B组[(1.78±0.94)％],差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 体外培养U251细胞时,采用特异性BDNF-siRNA能够显著降低BDNF、pAKt表达,同时,干扰BDNF表达能促进U251细胞的凋亡,推测与TrkB-Akt通路密切相关.
目的 應用特異性腦源性神經營養因子-小榦擾覈糖覈痠(brain derived neurotrophic factor-small interfering RNA,BDNF-siRNA)下調U251細胞中BDNF錶達,觀察對膠質瘤細胞凋亡的影響,併初步探討其相關機製.方法 將經體外培養的人膠質瘤細胞繫U251細胞隨機分為3組,其中A組為對照組,B組為non-silencing-siRNA組,C組為BDNF-siRNA組.通過Western blot法檢測細胞BDNF、AKt、pAKt蛋白的錶達,ELISA檢測各組BDNF的分泌水平,流式細胞儀法檢測各組U251細胞凋亡情況.結果 Western blot結果顯示:與A組和B組相比,C組BDNF、pAKt蛋白錶達顯著降低(P＜0.05).ELISA結果錶明C組U251細胞培養上清中BDNF含量為(70.20±3.05) pg/mL,與A相比有所降低,差異有統計學意義(P＜0.05).流式細胞儀檢測結果可見C組細胞的凋亡率為(19.62±2.50)％,顯著高于A組[(1.63±0.61)％]和B組[(1.78±0.94)％],差異均有統計學意義(P＜0.05).結論 體外培養U251細胞時,採用特異性BDNF-siRNA能夠顯著降低BDNF、pAKt錶達,同時,榦擾BDNF錶達能促進U251細胞的凋亡,推測與TrkB-Akt通路密切相關.
목적 응용특이성뇌원성신경영양인자-소간우핵당핵산(brain derived neurotrophic factor-small interfering RNA,BDNF-siRNA)하조U251세포중BDNF표체,관찰대효질류세포조망적영향,병초보탐토기상관궤제.방법 장경체외배양적인효질류세포계U251세포수궤분위3조,기중A조위대조조,B조위non-silencing-siRNA조,C조위BDNF-siRNA조.통과Western blot법검측세포BDNF、AKt、pAKt단백적표체,ELISA검측각조BDNF적분비수평,류식세포의법검측각조U251세포조망정황.결과 Western blot결과현시:여A조화B조상비,C조BDNF、pAKt단백표체현저강저(P＜0.05).ELISA결과표명C조U251세포배양상청중BDNF함량위(70.20±3.05) pg/mL,여A상비유소강저,차이유통계학의의(P＜0.05).류식세포의검측결과가견C조세포적조망솔위(19.62±2.50)％,현저고우A조[(1.63±0.61)％]화B조[(1.78±0.94)％],차이균유통계학의의(P＜0.05).결론 체외배양U251세포시,채용특이성BDNF-siRNA능구현저강저BDNF、pAKt표체,동시,간우BDNF표체능촉진U251세포적조망,추측여TrkB-Akt통로밀절상관.
