中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2015年
2期
182-186
,共5页
赵雪珂%吴荣敏%姚玉梅%国惠%何小慧
趙雪珂%吳榮敏%姚玉梅%國惠%何小慧
조설가%오영민%요옥매%국혜%하소혜
丹芍化纤胶囊%肝星状细胞%Gremlin%骨形态发生蛋白7%肝纤维化
丹芍化纖膠囊%肝星狀細胞%Gremlin%骨形態髮生蛋白7%肝纖維化
단작화섬효낭%간성상세포%Gremlin%골형태발생단백7%간섬유화
Danshao Huaxian capsule%hepatic stellate cell%Gremlin%bone morphogenetic protein 7%hepatic fibrosis
目的:观察丹芍化纤胶囊(DSHX)含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC) Gremlin和骨形态发生蛋白7(BMP7)表达的影响,探讨该药治疗肝纤维化的可能机制.方法:将20只雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组5只,分别经DSHX低剂量(0.5 g·kg-1),DSHX高剂量(1.0 g·kg-1),扶正化瘀胶囊(0.8 g·kg-1)及生理盐水ig5d,2次/d,其后股动脉取血制备大鼠DSHX含药血清、扶正化瘀胶囊含药血清及生理盐水血清,4组血清分别干预体外培养的HSC-T6,用MTT比色法测定各组HSC的增殖效应,ELISA法测培养液上清Ⅰ型胶原(Col Ⅰ),Ⅲ型胶原(ColⅢ)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的含量,免疫细胞染色法检测各组HSC内转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,采用RT-PCR法检测各组HSC Gremlin,BMP7 mRNA的表达,Western blot检测各组HSC Gremlin,BMP7蛋白的表达.结果:与生理盐水血清组比较,DSHX低、高剂量组含药血清均可显著抑制大鼠HSC的增殖(P＜0.05),抑制率与扶正化瘀胶囊血清组相当;DSHX低、高剂量血清组培养液上清Col Ⅰ,ColⅢ与α-SMA的含量明显减少(P＜0.01,P＜0.05);HSC内TGFβ1蛋白的表达强度显著降低(P＜0.01),与扶正化瘀胶囊血清组相当.与生理盐水血清组比较,DSHX低、高剂量血清组Gremlin mRNA及蛋白表达显著下降,而BMP7 mRNA及蛋白表达显著增多(P＜0.01),与扶正化瘀胶囊血清组相当.结论:丹芍化纤胶囊可抑制体外培养的大鼠HSC增殖与活化,减少细胞外基质的合成,对大鼠肝纤维化有潜在的治疗作用,其机制可能与下调HSC Gremlin,上调BMP7的表达有关.
目的:觀察丹芍化纖膠囊(DSHX)含藥血清對大鼠肝星狀細胞(HSC) Gremlin和骨形態髮生蛋白7(BMP7)錶達的影響,探討該藥治療肝纖維化的可能機製.方法:將20隻雄性Wistar大鼠隨機分為4組,每組5隻,分彆經DSHX低劑量(0.5 g·kg-1),DSHX高劑量(1.0 g·kg-1),扶正化瘀膠囊(0.8 g·kg-1)及生理鹽水ig5d,2次/d,其後股動脈取血製備大鼠DSHX含藥血清、扶正化瘀膠囊含藥血清及生理鹽水血清,4組血清分彆榦預體外培養的HSC-T6,用MTT比色法測定各組HSC的增殖效應,ELISA法測培養液上清Ⅰ型膠原(Col Ⅰ),Ⅲ型膠原(ColⅢ)及α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的含量,免疫細胞染色法檢測各組HSC內轉化生長因子β1(TGF-β1)的錶達,採用RT-PCR法檢測各組HSC Gremlin,BMP7 mRNA的錶達,Western blot檢測各組HSC Gremlin,BMP7蛋白的錶達.結果:與生理鹽水血清組比較,DSHX低、高劑量組含藥血清均可顯著抑製大鼠HSC的增殖(P＜0.05),抑製率與扶正化瘀膠囊血清組相噹;DSHX低、高劑量血清組培養液上清Col Ⅰ,ColⅢ與α-SMA的含量明顯減少(P＜0.01,P＜0.05);HSC內TGFβ1蛋白的錶達彊度顯著降低(P＜0.01),與扶正化瘀膠囊血清組相噹.與生理鹽水血清組比較,DSHX低、高劑量血清組Gremlin mRNA及蛋白錶達顯著下降,而BMP7 mRNA及蛋白錶達顯著增多(P＜0.01),與扶正化瘀膠囊血清組相噹.結論:丹芍化纖膠囊可抑製體外培養的大鼠HSC增殖與活化,減少細胞外基質的閤成,對大鼠肝纖維化有潛在的治療作用,其機製可能與下調HSC Gremlin,上調BMP7的錶達有關.
목적:관찰단작화섬효낭(DSHX)함약혈청대대서간성상세포(HSC) Gremlin화골형태발생단백7(BMP7)표체적영향,탐토해약치료간섬유화적가능궤제.방법:장20지웅성Wistar대서수궤분위4조,매조5지,분별경DSHX저제량(0.5 g·kg-1),DSHX고제량(1.0 g·kg-1),부정화어효낭(0.8 g·kg-1)급생리염수ig5d,2차/d,기후고동맥취혈제비대서DSHX함약혈청、부정화어효낭함약혈청급생리염수혈청,4조혈청분별간예체외배양적HSC-T6,용MTT비색법측정각조HSC적증식효응,ELISA법측배양액상청Ⅰ형효원(Col Ⅰ),Ⅲ형효원(ColⅢ)급α-평활기기동단백(α-SMA)적함량,면역세포염색법검측각조HSC내전화생장인자β1(TGF-β1)적표체,채용RT-PCR법검측각조HSC Gremlin,BMP7 mRNA적표체,Western blot검측각조HSC Gremlin,BMP7단백적표체.결과:여생리염수혈청조비교,DSHX저、고제량조함약혈청균가현저억제대서HSC적증식(P＜0.05),억제솔여부정화어효낭혈청조상당;DSHX저、고제량혈청조배양액상청Col Ⅰ,ColⅢ여α-SMA적함량명현감소(P＜0.01,P＜0.05);HSC내TGFβ1단백적표체강도현저강저(P＜0.01),여부정화어효낭혈청조상당.여생리염수혈청조비교,DSHX저、고제량혈청조Gremlin mRNA급단백표체현저하강,이BMP7 mRNA급단백표체현저증다(P＜0.01),여부정화어효낭혈청조상당.결론:단작화섬효낭가억제체외배양적대서HSC증식여활화,감소세포외기질적합성,대대서간섬유화유잠재적치료작용,기궤제가능여하조HSC Gremlin,상조BMP7적표체유관.
