中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2015年
2期
125-129
,共5页
白莉%宋宇%方伟蓉%孔毅%李运曼
白莉%宋宇%方偉蓉%孔毅%李運曼
백리%송우%방위용%공의%리운만
蛇毒三肽pENW%脂多糖%人脐静脉内皮细胞%一氧化氮%一氧化氮合酶
蛇毒三肽pENW%脂多糖%人臍靜脈內皮細胞%一氧化氮%一氧化氮閤酶
사독삼태pENW%지다당%인제정맥내피세포%일양화담%일양화담합매
pENW%lipopolysaccharide%human umbilical vein endothelial cells%nitric oxide%nitric-oxide synthase
目的:探讨焦谷氨酸-天冬酰胺-色氨酸(蛇毒三肽pENW)对体外脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护机制.方法:采用LPS(1 mg·L-1)模拟人脐静脉内皮细胞炎症损伤模型,实验分为空白组、LPS模型组、蛇毒三肽pENW高、中、低剂量组(10-4,10-5,10-6 mol· L-1)、N-甲基-L-精氨酸组(L-NMMA,5×10-4mol· L-1);除空白组外,其余各试验组加入LPS,蛇毒三肽pENW高、中、低剂量组和L-NMMA组同时给予不同浓度的药物,孵育24 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人脐静脉内皮细胞活力;Griess Reagent法用于检测一氧化氮(NO)的含量;比色法测定一氧化氮合酶(NOS)分型的活力;Western blot分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的变化.结果:与空白组比较,模型组LPS显著性损伤人脐静脉内皮细胞并诱导NO大量释放,tNOS,iNOS的活性明显增强(P＜0.01),iNOS蛋白表达显著上调(P＜0.01),eNOS的活性和蛋白表达并无差异;与模型组比较,蛇毒三肽pENW高、中、低剂量能够剂量依赖性的抑制LPS对人脐静脉内皮细胞的损伤,并且能够明显降低NO的释放,同时,蛇毒三肽pENW高、中、低剂量能够降低LPS诱导人脐静脉内皮细胞中的tNOS,iNOS的活性及iNOS的蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01),与L-NMMA组作用一致,但蛇毒三肽pENW对人脐静脉内皮细胞中eNOS的活性及蛋白表达无显著性影响.结论:蛇毒三肽pENW可降低LPS对人脐静脉内皮细胞的损伤作用,其保护机制可能与逆转LPS诱导的iNOS蛋白表达上调及NO的释放相关.
目的:探討焦穀氨痠-天鼕酰胺-色氨痠(蛇毒三肽pENW)對體外脂多糖(LPS)誘導人臍靜脈內皮細胞損傷的保護機製.方法:採用LPS(1 mg·L-1)模擬人臍靜脈內皮細胞炎癥損傷模型,實驗分為空白組、LPS模型組、蛇毒三肽pENW高、中、低劑量組(10-4,10-5,10-6 mol· L-1)、N-甲基-L-精氨痠組(L-NMMA,5×10-4mol· L-1);除空白組外,其餘各試驗組加入LPS,蛇毒三肽pENW高、中、低劑量組和L-NMMA組同時給予不同濃度的藥物,孵育24 h後,採用噻唑藍(MTT)比色法檢測人臍靜脈內皮細胞活力;Griess Reagent法用于檢測一氧化氮(NO)的含量;比色法測定一氧化氮閤酶(NOS)分型的活力;Western blot分析內皮型一氧化氮閤酶(eNOS),誘導型一氧化氮閤酶(iNOS)蛋白錶達的變化.結果:與空白組比較,模型組LPS顯著性損傷人臍靜脈內皮細胞併誘導NO大量釋放,tNOS,iNOS的活性明顯增彊(P＜0.01),iNOS蛋白錶達顯著上調(P＜0.01),eNOS的活性和蛋白錶達併無差異;與模型組比較,蛇毒三肽pENW高、中、低劑量能夠劑量依賴性的抑製LPS對人臍靜脈內皮細胞的損傷,併且能夠明顯降低NO的釋放,同時,蛇毒三肽pENW高、中、低劑量能夠降低LPS誘導人臍靜脈內皮細胞中的tNOS,iNOS的活性及iNOS的蛋白錶達(P ＜0.05,P＜0.01),與L-NMMA組作用一緻,但蛇毒三肽pENW對人臍靜脈內皮細胞中eNOS的活性及蛋白錶達無顯著性影響.結論:蛇毒三肽pENW可降低LPS對人臍靜脈內皮細胞的損傷作用,其保護機製可能與逆轉LPS誘導的iNOS蛋白錶達上調及NO的釋放相關.
목적:탐토초곡안산-천동선알-색안산(사독삼태pENW)대체외지다당(LPS)유도인제정맥내피세포손상적보호궤제.방법:채용LPS(1 mg·L-1)모의인제정맥내피세포염증손상모형,실험분위공백조、LPS모형조、사독삼태pENW고、중、저제량조(10-4,10-5,10-6 mol· L-1)、N-갑기-L-정안산조(L-NMMA,5×10-4mol· L-1);제공백조외,기여각시험조가입LPS,사독삼태pENW고、중、저제량조화L-NMMA조동시급여불동농도적약물,부육24 h후,채용새서람(MTT)비색법검측인제정맥내피세포활력;Griess Reagent법용우검측일양화담(NO)적함량;비색법측정일양화담합매(NOS)분형적활력;Western blot분석내피형일양화담합매(eNOS),유도형일양화담합매(iNOS)단백표체적변화.결과:여공백조비교,모형조LPS현저성손상인제정맥내피세포병유도NO대량석방,tNOS,iNOS적활성명현증강(P＜0.01),iNOS단백표체현저상조(P＜0.01),eNOS적활성화단백표체병무차이;여모형조비교,사독삼태pENW고、중、저제량능구제량의뢰성적억제LPS대인제정맥내피세포적손상,병차능구명현강저NO적석방,동시,사독삼태pENW고、중、저제량능구강저LPS유도인제정맥내피세포중적tNOS,iNOS적활성급iNOS적단백표체(P ＜0.05,P＜0.01),여L-NMMA조작용일치,단사독삼태pENW대인제정맥내피세포중eNOS적활성급단백표체무현저성영향.결론:사독삼태pENW가강저LPS대인제정맥내피세포적손상작용,기보호궤제가능여역전LPS유도적iNOS단백표체상조급NO적석방상관.
