中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2015年
2期
120-124
,共5页
杨莹%刘吉成%丛欢%韩翠翠%马立威%简白羽
楊瑩%劉吉成%叢歡%韓翠翠%馬立威%簡白羽
양형%류길성%총환%한취취%마립위%간백우
12-去氧佛波醇-13-棕榈酸酯%人乳腺癌MCF-7细胞%血管内皮生长因子%低氧诱导因子%Von Hippel-Lindau蛋白
12-去氧彿波醇-13-棕櫚痠酯%人乳腺癌MCF-7細胞%血管內皮生長因子%低氧誘導因子%Von Hippel-Lindau蛋白
12-거양불파순-13-종려산지%인유선암MCF-7세포%혈관내피생장인자%저양유도인자%Von Hippel-Lindau단백
12-deoxyphorbol-13-palmitate%human breast cancer MCF-7 cells%vascular endothelial growth factor%hypoxia induced factor 1 alpha%Von Hippel-Lindau
目的:观察狼毒大戟根部提取物12-去氧佛波醇-13-棕榈酸酯(12-deoxyphorbol 13-palmitate,DP)对MCF-7细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,及其是否通过Von Hippel-Lindau蛋白(VHL)/低氧诱导因子(HIr-1α)信号通路进行调节.方法:实验分为常氧空白组、常氧实验组(10,20,40 μmol·L-1DP)、乏氧空白组和乏氧实验组(10,20,40 μmol·L1DP),其中乏氧空白组和乏氧实验组用150 μmol·L-1CoCl2预处理细胞.当细胞密度达70％ ～80％时进行药物处理;MTT法检测DP对MCF-7细胞在6,12,24 h细胞存活率的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测DP对MCF-7细胞分泌VEGF的影响;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测DP对VEGF mRNA表达的影响;Western blot检测DP对MCF-7细胞中VEGF,HIF-1α和VHL蛋白表达;细胞免疫荧光法(IF)检测DP对HIF-1α表达及其在细胞中分布的影响.结果:MTT法结果显示,乏氧状态下细胞存活率在12,24 h且DP浓度为20,40 μmol·L-1时与对照组相比有显著性差异(P＜0.05);乏氧条件下,VEGF和HIF-1α的表达较常氧条件下升高,与乏氧组相比,DP能降低VEGF(P ＜0.05)和HIF-1α(P＜0.05)的表达;乏氧条件下VHL表达较常氧条件下降低,当药物处理后,相较于乏氧组,VHL浓度明显上升(P＜0.05).结论:DP可能通过调节VHL/HIF-1α信号通路从而下调MCF-7细胞VEGF表达.
目的:觀察狼毒大戟根部提取物12-去氧彿波醇-13-棕櫚痠酯(12-deoxyphorbol 13-palmitate,DP)對MCF-7細胞血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)錶達的影響,及其是否通過Von Hippel-Lindau蛋白(VHL)/低氧誘導因子(HIr-1α)信號通路進行調節.方法:實驗分為常氧空白組、常氧實驗組(10,20,40 μmol·L-1DP)、乏氧空白組和乏氧實驗組(10,20,40 μmol·L1DP),其中乏氧空白組和乏氧實驗組用150 μmol·L-1CoCl2預處理細胞.噹細胞密度達70％ ～80％時進行藥物處理;MTT法檢測DP對MCF-7細胞在6,12,24 h細胞存活率的影響;酶聯免疫吸附測定(ELISA)檢測DP對MCF-7細胞分泌VEGF的影響;實時熒光定量PCR法(RT-qPCR)檢測DP對VEGF mRNA錶達的影響;Western blot檢測DP對MCF-7細胞中VEGF,HIF-1α和VHL蛋白錶達;細胞免疫熒光法(IF)檢測DP對HIF-1α錶達及其在細胞中分佈的影響.結果:MTT法結果顯示,乏氧狀態下細胞存活率在12,24 h且DP濃度為20,40 μmol·L-1時與對照組相比有顯著性差異(P＜0.05);乏氧條件下,VEGF和HIF-1α的錶達較常氧條件下升高,與乏氧組相比,DP能降低VEGF(P ＜0.05)和HIF-1α(P＜0.05)的錶達;乏氧條件下VHL錶達較常氧條件下降低,噹藥物處理後,相較于乏氧組,VHL濃度明顯上升(P＜0.05).結論:DP可能通過調節VHL/HIF-1α信號通路從而下調MCF-7細胞VEGF錶達.
목적:관찰랑독대극근부제취물12-거양불파순-13-종려산지(12-deoxyphorbol 13-palmitate,DP)대MCF-7세포혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)표체적영향,급기시부통과Von Hippel-Lindau단백(VHL)/저양유도인자(HIr-1α)신호통로진행조절.방법:실험분위상양공백조、상양실험조(10,20,40 μmol·L-1DP)、핍양공백조화핍양실험조(10,20,40 μmol·L1DP),기중핍양공백조화핍양실험조용150 μmol·L-1CoCl2예처리세포.당세포밀도체70％ ～80％시진행약물처리;MTT법검측DP대MCF-7세포재6,12,24 h세포존활솔적영향;매련면역흡부측정(ELISA)검측DP대MCF-7세포분비VEGF적영향;실시형광정량PCR법(RT-qPCR)검측DP대VEGF mRNA표체적영향;Western blot검측DP대MCF-7세포중VEGF,HIF-1α화VHL단백표체;세포면역형광법(IF)검측DP대HIF-1α표체급기재세포중분포적영향.결과:MTT법결과현시,핍양상태하세포존활솔재12,24 h차DP농도위20,40 μmol·L-1시여대조조상비유현저성차이(P＜0.05);핍양조건하,VEGF화HIF-1α적표체교상양조건하승고,여핍양조상비,DP능강저VEGF(P ＜0.05)화HIF-1α(P＜0.05)적표체;핍양조건하VHL표체교상양조건하강저,당약물처리후,상교우핍양조,VHL농도명현상승(P＜0.05).결론:DP가능통과조절VHL/HIF-1α신호통로종이하조MCF-7세포VEGF표체.
