徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2014年
11期
725-728
,共4页
结合免疫球蛋白%pTRUF11-GFP载体%真核表达
結閤免疫毬蛋白%pTRUF11-GFP載體%真覈錶達
결합면역구단백%pTRUF11-GFP재체%진핵표체
Bip%pTRUF11-GFP vector%eukaryotic expression
目的 构建Bip蛋白真核表达重组体用于缺血性脑损伤机制的研究.方法 用RT-PCR方法获得Bip的cDNA;与TOPO载体连结,连接产物转化大肠杆菌DH5α进行筛选、序列测定;Bip cDNA片段亚克隆到真核表达载体pTRUF11-GFP;重组体pTRUF11-GFP-Bip转到293H细胞,Western blot鉴定Bip的表达.结果 ①经RT-PCR法得到了Bip的双链cDNA;②Bip测序图谱与GeneBank报道完全一致;③酶切鉴定能观察到Bip和pTRUF11-GFP两条带;④Western blot检测pTRUF11-GFP-Bip能表达Bip蛋白.结论 获得了能真核表达Bip蛋白的重组体.
目的 構建Bip蛋白真覈錶達重組體用于缺血性腦損傷機製的研究.方法 用RT-PCR方法穫得Bip的cDNA;與TOPO載體連結,連接產物轉化大腸桿菌DH5α進行篩選、序列測定;Bip cDNA片段亞剋隆到真覈錶達載體pTRUF11-GFP;重組體pTRUF11-GFP-Bip轉到293H細胞,Western blot鑒定Bip的錶達.結果 ①經RT-PCR法得到瞭Bip的雙鏈cDNA;②Bip測序圖譜與GeneBank報道完全一緻;③酶切鑒定能觀察到Bip和pTRUF11-GFP兩條帶;④Western blot檢測pTRUF11-GFP-Bip能錶達Bip蛋白.結論 穫得瞭能真覈錶達Bip蛋白的重組體.
목적 구건Bip단백진핵표체중조체용우결혈성뇌손상궤제적연구.방법 용RT-PCR방법획득Bip적cDNA;여TOPO재체련결,련접산물전화대장간균DH5α진행사선、서렬측정;Bip cDNA편단아극륭도진핵표체재체pTRUF11-GFP;중조체pTRUF11-GFP-Bip전도293H세포,Western blot감정Bip적표체.결과 ①경RT-PCR법득도료Bip적쌍련cDNA;②Bip측서도보여GeneBank보도완전일치;③매절감정능관찰도Bip화pTRUF11-GFP량조대;④Western blot검측pTRUF11-GFP-Bip능표체Bip단백.결론 획득료능진핵표체Bip단백적중조체.
