华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2014年
z1期
40-43
,共4页
李杰%赵金风%张爽%杜克久
李傑%趙金風%張爽%杜剋久
리걸%조금풍%장상%두극구
木质部特异启动子%筛选%GUS报告基因%荧光定量检测
木質部特異啟動子%篩選%GUS報告基因%熒光定量檢測
목질부특이계동자%사선%GUS보고기인%형광정량검측
Xylem specific promoter%Screening%GUS reporter gene%Fluorescence quantitative detection
为了筛选到具有木质部组织特异性并有较强功能的启动子,将河北林木种质资源与森林保护重点实验室前期已获得的MDCesA启动子、JCesAP启动子、DMDCesAP启动子(含2个串联MDCesAP启动子)融合GUS报告基因的pMDCesAP-GUS、pJCesAP-GUS、pDMDCesAP-GUS这3个植物表达载体,通过农杆菌介导转化杨树,对转化后的杨树进行GUS活性的定性及荧光定量检测,以比较3个启动子在转基因植物中的表达能力和水平。筛选到的组织特异启动子与抗天牛基因融合,将提高毒蛋白在相应部位的表达量,这对天牛类蛀干害虫的防治具有重大意义。
為瞭篩選到具有木質部組織特異性併有較彊功能的啟動子,將河北林木種質資源與森林保護重點實驗室前期已穫得的MDCesA啟動子、JCesAP啟動子、DMDCesAP啟動子(含2箇串聯MDCesAP啟動子)融閤GUS報告基因的pMDCesAP-GUS、pJCesAP-GUS、pDMDCesAP-GUS這3箇植物錶達載體,通過農桿菌介導轉化楊樹,對轉化後的楊樹進行GUS活性的定性及熒光定量檢測,以比較3箇啟動子在轉基因植物中的錶達能力和水平。篩選到的組織特異啟動子與抗天牛基因融閤,將提高毒蛋白在相應部位的錶達量,這對天牛類蛀榦害蟲的防治具有重大意義。
위료사선도구유목질부조직특이성병유교강공능적계동자,장하북림목충질자원여삼림보호중점실험실전기이획득적MDCesA계동자、JCesAP계동자、DMDCesAP계동자(함2개천련MDCesAP계동자)융합GUS보고기인적pMDCesAP-GUS、pJCesAP-GUS、pDMDCesAP-GUS저3개식물표체재체,통과농간균개도전화양수,대전화후적양수진행GUS활성적정성급형광정량검측,이비교3개계동자재전기인식물중적표체능력화수평。사선도적조직특이계동자여항천우기인융합,장제고독단백재상응부위적표체량,저대천우류주간해충적방치구유중대의의。
In order to screen the xylem tissue specific and strong function promoter ,three plant expression vec-tor pMDCesAP-GUS,pJCesAP-GUS,pDMDCesAP-GUS,fused with GUS report gene and MDCesA promoter ,JCesAP promoter ,DMDCesAP promoter ( including two series MDCesAP promoter ) acquired earlier ,are transformed to pop-lar by agrobacterium mediated transformation .With qualitative and quantitative fluorescence detection of GUS activi-ty,the three promoter in transgenic plants expressing ability and level are detected .Fusion of the screened xylem specific promoter and insect-resistant gene will improve the poisonous protein expression in the xylem of the quanti-ty,which is of great significance for prevention and control of boring beetles .