CAJ | 학술논문

目的:探讨PKCε-siRNA对人宫颈癌ME180细胞蛋白激酶Cε(PKCε) mRNA、蛋白表达及ME180细胞增殖与侵袭能力影响.方法:建立PKCε-siRNA转染组(实验组)、NC-siRNA转染组(阴性对照组)、未行处理组(对照组).Real-time PCR法检测各组细胞PKCε mRNA表达.Western-blot法检测各组PKCε、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达.采用MTT比色法观察各组细胞增殖能力,采用划痕实验观察各组细胞迁移能力,采用Transwell法观察各组细胞侵袭能力,荧光素酶报告基因检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的活性.结果:与对照组相比,实验组PKCε mRNA明显降低,表达量为对照组的18.3％,两组差异有统计学意义(P＜0.05).PKCε、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达水平明显降低.在MTr实验中,实验组细胞72小时的A值为0.517±0.031,与对照组(0.925±0.063)相比增殖能力明显降低,两组差异有统计学意义(P＜0.05).实验组迁移和侵袭能力明显低于对照组.实验组MAPK转录活性(4.5±0.2)低于对照组(16.3±0.9),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:通过siRNA技术降低PKCε表达,可有效干扰MAPK通路,明显抑制宫颈癌ME180细胞增殖及迁移侵袭能力.
목적:탐토PKCε-siRNA대인궁경암ME180세포단백격매Cε(PKCε) mRNA、단백표체급ME180세포증식여침습능력영향.방법:건립PKCε-siRNA전염조(실험조)、NC-siRNA전염조(음성대조조)、미행처리조(대조조).Real-time PCR법검측각조세포PKCε mRNA표체.Western-blot법검측각조PKCε、세포주기단백D1(Cyclin D1)、기질금속단백매2(MMP-2)단백표체.채용MTT비색법관찰각조세포증식능력,채용화흔실험관찰각조세포천이능력,채용Transwell법관찰각조세포침습능력,형광소매보고기인검측사렬원활화단백격매(MAPK)신호통로적활성.결과:여대조조상비,실험조PKCε mRNA명현강저,표체량위대조조적18.3％,량조차이유통계학의의(P＜0.05).PKCε、Cyclin D1、MMP-2단백표체수평명현강저.재MTr실험중,실험조세포72소시적A치위0.517±0.031,여대조조(0.925±0.063)상비증식능력명현강저,량조차이유통계학의의(P＜0.05).실험조천이화침습능력명현저우대조조.실험조MAPK전록활성(4.5±0.2)저우대조조(16.3±0.9),차이유통계학의의(P＜0.05).결론:통과siRNA기술강저PKCε표체,가유효간우MAPK통로,명현억제궁경암ME180세포증식급천이침습능력.