西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2014年
12期
2388-2393
,共6页
程召阳%孙虹丽%衡伟%贾兵%刘莉%叶振风%朱立武
程召暘%孫虹麗%衡偉%賈兵%劉莉%葉振風%硃立武
정소양%손홍려%형위%가병%류리%협진풍%주립무
梨%褐皮芽变%木葡聚糖转葡糖苷酶基因%实时荧光定量PCR
梨%褐皮芽變%木葡聚糖轉葡糖苷酶基因%實時熒光定量PCR
리%갈피아변%목포취당전포당감매기인%실시형광정량PCR
pear%russet fruit mutant%XET gene%qRT-PCR
为研究‘砀山酥梨’及其褐皮芽变木葡聚糖转葡糖苷酶基因(PbXET)表达水平差异,该实验利用RACE技术,克隆了梨PbXET基因;采用实时荧光定量PCR技术,分析了梨树叶片、果皮和果肉等不同组织及花后不同时期果皮中PbXET基因表达差异.结果表明:(1)梨PbXET3 (KJ690921)和PbXET4(KJ690922)开放阅读框分别为903 bp和891 bp,分别编码300和296个氨基酸;氨基酸序列聚类分析显示,PbXET3与苹果MdXET3以及PbXET4与苹果MdXET-5的亲缘关系最近.(2)半定量PCR分析显示,花后150 d,PbXET3和PbXET4基因在‘砀山酥梨’和‘锈酥’不同组织中均有表达,且PbXET3在叶片中表达量很低,在果皮、果肉中表达相对较强,其中叶片中PbXET3表达量低于PbXET4,而果肉和果皮中PbXET3的表达均明显高于PbXET4.(3)荧光定量PCR分析发现,在‘砀山酥梨’和‘锈酥’果皮中,PbXET3和PbXET4基因不同时期的表达量变化趋势不同;与‘砀山酥梨’相比,果皮颜色发生变化(花后100 d)之后,‘锈酥’果皮中PbXET3表达量骤减;而果皮颜色发生变化(花后100 d)之前,PbXET4表达量均显著降低.由此推测,PbXET3和PbXET4基因参与了‘锈酥’果皮褐色形成的调节,其表达水平差异可能是改变‘锈酥’表皮细胞结构的重要原因之一.
為研究‘碭山酥梨’及其褐皮芽變木葡聚糖轉葡糖苷酶基因(PbXET)錶達水平差異,該實驗利用RACE技術,剋隆瞭梨PbXET基因;採用實時熒光定量PCR技術,分析瞭梨樹葉片、果皮和果肉等不同組織及花後不同時期果皮中PbXET基因錶達差異.結果錶明:(1)梨PbXET3 (KJ690921)和PbXET4(KJ690922)開放閱讀框分彆為903 bp和891 bp,分彆編碼300和296箇氨基痠;氨基痠序列聚類分析顯示,PbXET3與蘋果MdXET3以及PbXET4與蘋果MdXET-5的親緣關繫最近.(2)半定量PCR分析顯示,花後150 d,PbXET3和PbXET4基因在‘碭山酥梨’和‘鏽酥’不同組織中均有錶達,且PbXET3在葉片中錶達量很低,在果皮、果肉中錶達相對較彊,其中葉片中PbXET3錶達量低于PbXET4,而果肉和果皮中PbXET3的錶達均明顯高于PbXET4.(3)熒光定量PCR分析髮現,在‘碭山酥梨’和‘鏽酥’果皮中,PbXET3和PbXET4基因不同時期的錶達量變化趨勢不同;與‘碭山酥梨’相比,果皮顏色髮生變化(花後100 d)之後,‘鏽酥’果皮中PbXET3錶達量驟減;而果皮顏色髮生變化(花後100 d)之前,PbXET4錶達量均顯著降低.由此推測,PbXET3和PbXET4基因參與瞭‘鏽酥’果皮褐色形成的調節,其錶達水平差異可能是改變‘鏽酥’錶皮細胞結構的重要原因之一.
위연구‘탕산소리’급기갈피아변목포취당전포당감매기인(PbXET)표체수평차이,해실험이용RACE기술,극륭료리PbXET기인;채용실시형광정량PCR기술,분석료리수협편、과피화과육등불동조직급화후불동시기과피중PbXET기인표체차이.결과표명:(1)리PbXET3 (KJ690921)화PbXET4(KJ690922)개방열독광분별위903 bp화891 bp,분별편마300화296개안기산;안기산서렬취류분석현시,PbXET3여평과MdXET3이급PbXET4여평과MdXET-5적친연관계최근.(2)반정량PCR분석현시,화후150 d,PbXET3화PbXET4기인재‘탕산소리’화‘수소’불동조직중균유표체,차PbXET3재협편중표체량흔저,재과피、과육중표체상대교강,기중협편중PbXET3표체량저우PbXET4,이과육화과피중PbXET3적표체균명현고우PbXET4.(3)형광정량PCR분석발현,재‘탕산소리’화‘수소’과피중,PbXET3화PbXET4기인불동시기적표체량변화추세불동;여‘탕산소리’상비,과피안색발생변화(화후100 d)지후,‘수소’과피중PbXET3표체량취감;이과피안색발생변화(화후100 d)지전,PbXET4표체량균현저강저.유차추측,PbXET3화PbXET4기인삼여료‘수소’과피갈색형성적조절,기표체수평차이가능시개변‘수소’표피세포결구적중요원인지일.