畜牧兽医杂志
畜牧獸醫雜誌
축목수의잡지
JOURNAL OF ANIMAL SCIAENCE AND VETERINARY MEDICINE
2015年
1期
18-21
,共4页
豆玲%豆思远%周峰%王佳%尚立宏%曹丽萍%鄂承钧
豆玲%豆思遠%週峰%王佳%尚立宏%曹麗萍%鄂承鈞
두령%두사원%주봉%왕가%상립굉%조려평%악승균
奶牛%结核病%IFN-γ基因%原核表达
奶牛%結覈病%IFN-γ基因%原覈錶達
내우%결핵병%IFN-γ기인%원핵표체
动物机体内γ-干扰素(IFN-γ)是可被多种物质诱导产生的生物活性蛋白,克隆和诱导表达奶牛结核病IFN-γ蛋白,对于采用ELISA诊断牛结核病有着重要意义.本研究利用RT-PCR方法克隆了奶牛结核病IFN-γ基因,并成功构建了IFN-γ基因的原核表达载体重组质粒pET28a-IFN-γ,转入E.coli BL21 (DE3)中进行诱导表达,并对条件进行了优化.SDS-PAGE与West-ern Blot结果显示,在37℃条件下,0.75mmol/L IPTG诱导4h可见重组蛋白BovIFN-γ大量表达.本研究成功建立了利用原核表达系统获得牛IFN-γ蛋白的方法,对后续利用该蛋白作为免疫原,从而建立ELISA诊断方法奠定了基础.
動物機體內γ-榦擾素(IFN-γ)是可被多種物質誘導產生的生物活性蛋白,剋隆和誘導錶達奶牛結覈病IFN-γ蛋白,對于採用ELISA診斷牛結覈病有著重要意義.本研究利用RT-PCR方法剋隆瞭奶牛結覈病IFN-γ基因,併成功構建瞭IFN-γ基因的原覈錶達載體重組質粒pET28a-IFN-γ,轉入E.coli BL21 (DE3)中進行誘導錶達,併對條件進行瞭優化.SDS-PAGE與West-ern Blot結果顯示,在37℃條件下,0.75mmol/L IPTG誘導4h可見重組蛋白BovIFN-γ大量錶達.本研究成功建立瞭利用原覈錶達繫統穫得牛IFN-γ蛋白的方法,對後續利用該蛋白作為免疫原,從而建立ELISA診斷方法奠定瞭基礎.
동물궤체내γ-간우소(IFN-γ)시가피다충물질유도산생적생물활성단백,극륭화유도표체내우결핵병IFN-γ단백,대우채용ELISA진단우결핵병유착중요의의.본연구이용RT-PCR방법극륭료내우결핵병IFN-γ기인,병성공구건료IFN-γ기인적원핵표체재체중조질립pET28a-IFN-γ,전입E.coli BL21 (DE3)중진행유도표체,병대조건진행료우화.SDS-PAGE여West-ern Blot결과현시,재37℃조건하,0.75mmol/L IPTG유도4h가견중조단백BovIFN-γ대량표체.본연구성공건립료이용원핵표체계통획득우IFN-γ단백적방법,대후속이용해단백작위면역원,종이건립ELISA진단방법전정료기출.
