食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2014年
24期
213-218
,共6页
高世光%王海燕%郭慧%冯华炜%于洋%麻丽丹
高世光%王海燕%郭慧%馮華煒%于洋%痳麗丹
고세광%왕해연%곽혜%풍화위%우양%마려단
草莓%甲型肝炎病毒%病毒富集%RNA提取
草莓%甲型肝炎病毒%病毒富集%RNA提取
초매%갑형간염병독%병독부집%RNA제취
strawberry%hepatitis A virus%virus enrichment%RNA extraction
目的:建立草莓中甲型肝炎病毒(hapatitis A virus,HAV)的有效富集方法及病毒RNA提取方法,用于草莓中HAV检测.方法:利用甲肝减毒疫苗对已知阴性的草莓样品进行人工污染,通过有效富集条件的优化及RNA提取后,采用实时荧光逆转录-聚合酶链式反应进行检测.结果:病毒富集选择Tris-甘氨酸-1 g/100 mL牛肉浸提物缓冲液洗脱、果胶酶30 U、氯仿-正丁醇为抑制剂去除剂、聚乙二醇沉淀、5℃孵育1h等优化条件,检测灵敏度较高;最优RNA提取方法为美国ABI公司生产的RNA提取试剂盒.采用优化后的方法对草莓样品中HAV病毒的检测显示,该病毒粒子的检测灵敏度可以达31.36 CCID5020 g样品.同时对50份送检样品进行检测,结果均为阴性.结论:所建立的病毒富集方法和核酸提取方法更适合草莓样品中HAV的检测,灵敏度较高.
目的:建立草莓中甲型肝炎病毒(hapatitis A virus,HAV)的有效富集方法及病毒RNA提取方法,用于草莓中HAV檢測.方法:利用甲肝減毒疫苗對已知陰性的草莓樣品進行人工汙染,通過有效富集條件的優化及RNA提取後,採用實時熒光逆轉錄-聚閤酶鏈式反應進行檢測.結果:病毒富集選擇Tris-甘氨痠-1 g/100 mL牛肉浸提物緩遲液洗脫、果膠酶30 U、氯倣-正丁醇為抑製劑去除劑、聚乙二醇沉澱、5℃孵育1h等優化條件,檢測靈敏度較高;最優RNA提取方法為美國ABI公司生產的RNA提取試劑盒.採用優化後的方法對草莓樣品中HAV病毒的檢測顯示,該病毒粒子的檢測靈敏度可以達31.36 CCID5020 g樣品.同時對50份送檢樣品進行檢測,結果均為陰性.結論:所建立的病毒富集方法和覈痠提取方法更適閤草莓樣品中HAV的檢測,靈敏度較高.
목적:건립초매중갑형간염병독(hapatitis A virus,HAV)적유효부집방법급병독RNA제취방법,용우초매중HAV검측.방법:이용갑간감독역묘대이지음성적초매양품진행인공오염,통과유효부집조건적우화급RNA제취후,채용실시형광역전록-취합매련식반응진행검측.결과:병독부집선택Tris-감안산-1 g/100 mL우육침제물완충액세탈、과효매30 U、록방-정정순위억제제거제제、취을이순침정、5℃부육1h등우화조건,검측령민도교고;최우RNA제취방법위미국ABI공사생산적RNA제취시제합.채용우화후적방법대초매양품중HAV병독적검측현시,해병독입자적검측령민도가이체31.36 CCID5020 g양품.동시대50빈송검양품진행검측,결과균위음성.결론:소건립적병독부집방법화핵산제취방법경괄합초매양품중HAV적검측,령민도교고.
