河南医学研究
河南醫學研究
하남의학연구
HENAN MEDICAL RESEARCH
2014年
11期
1-5
,共5页
冯潇%杨成梁%郑晓丽%翟冲亚%赵慧云%葛红
馮瀟%楊成樑%鄭曉麗%翟遲亞%趙慧雲%葛紅
풍소%양성량%정효려%적충아%조혜운%갈홍
RNA干扰%乏氧诱导因子%基质金属蛋白酶-2
RNA榦擾%乏氧誘導因子%基質金屬蛋白酶-2
RNA간우%핍양유도인자%기질금속단백매-2
目的:探讨质粒介导RNA干扰抑制HIF-1α基因对肺癌A549细胞转移和侵袭能力的影响.方法:利用基因工程方法构建HIF-1α的干扰表达载体,并将其转染至肺腺癌A549细胞;分别用RT-PCR方法、Western blot方法检测细胞转染前后HIF-1d以及MMP-2的mRNA及蛋白表达的变化.细胞划痕试验和Tran-swell实验检测转染前后肺腺癌A549细胞迁移及侵袭能力的改变.结果:转染后脯腺癌A549细胞中HIF-1α和MMP-2的mRNA表达分别下降86％和64％ (P ＜0.05).转染后细胞蛋白表达明显下降.转染前后穿膜细胞数分别为(135.2±13.2)、(63.7±10.5),差异具有统计学意义(P＜0.05).转染前后划痕宽度分别为(0.48±0.14)、(1.04±0.15)mm,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:RNAi可有效抑制HIF-1α的表达,同时可结合MMP-2启动子下调MMP-2基因和蛋白的表达,降低肺癌A549细胞的转移和侵袭能力.
目的:探討質粒介導RNA榦擾抑製HIF-1α基因對肺癌A549細胞轉移和侵襲能力的影響.方法:利用基因工程方法構建HIF-1α的榦擾錶達載體,併將其轉染至肺腺癌A549細胞;分彆用RT-PCR方法、Western blot方法檢測細胞轉染前後HIF-1d以及MMP-2的mRNA及蛋白錶達的變化.細胞劃痕試驗和Tran-swell實驗檢測轉染前後肺腺癌A549細胞遷移及侵襲能力的改變.結果:轉染後脯腺癌A549細胞中HIF-1α和MMP-2的mRNA錶達分彆下降86％和64％ (P ＜0.05).轉染後細胞蛋白錶達明顯下降.轉染前後穿膜細胞數分彆為(135.2±13.2)、(63.7±10.5),差異具有統計學意義(P＜0.05).轉染前後劃痕寬度分彆為(0.48±0.14)、(1.04±0.15)mm,差異具有統計學意義(P＜0.05).結論:RNAi可有效抑製HIF-1α的錶達,同時可結閤MMP-2啟動子下調MMP-2基因和蛋白的錶達,降低肺癌A549細胞的轉移和侵襲能力.
목적:탐토질립개도RNA간우억제HIF-1α기인대폐암A549세포전이화침습능력적영향.방법:이용기인공정방법구건HIF-1α적간우표체재체,병장기전염지폐선암A549세포;분별용RT-PCR방법、Western blot방법검측세포전염전후HIF-1d이급MMP-2적mRNA급단백표체적변화.세포화흔시험화Tran-swell실험검측전염전후폐선암A549세포천이급침습능력적개변.결과:전염후포선암A549세포중HIF-1α화MMP-2적mRNA표체분별하강86％화64％ (P ＜0.05).전염후세포단백표체명현하강.전염전후천막세포수분별위(135.2±13.2)、(63.7±10.5),차이구유통계학의의(P＜0.05).전염전후화흔관도분별위(0.48±0.14)、(1.04±0.15)mm,차이구유통계학의의(P＜0.05).결론:RNAi가유효억제HIF-1α적표체,동시가결합MMP-2계동자하조MMP-2기인화단백적표체,강저폐암A549세포적전이화침습능력.
