CAJ | 학술논문

抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)是清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)的重要酶类.本研究对针刺接种黑粉菌(Sporisorium scitamineum)后的抗、感基因型甘蔗(Saccharum officinarum)进行APX活性测定.结果表明,甘蔗接种黑穗病菌48h内,抗病品种(崖城05-179) APX活性显著高于感病品种(柳城03-182) (P＜0.05).借助电子克隆技术,结合RT-PCR方法,从甘蔗中分离到一个APX基因,并命名为ScAPX(GenBank登录号:KJ7565501).生物信息学分析显示,ScAPX基因全长l 171bp,包含一个1 038 bp的完整开放阅读框,编码345个氨基酸.ScAPX编码的蛋白不含信号肽,推测其为非分泌蛋白,定位于线粒体基质和叶绿体基质中的概率分别为91.1％和88.7％.实时荧光定量PCR检测结果显示,ScAPX在甘蔗根、芽、叶、蔗皮和蔗髓中均有表达,为组成型表达基因,表达量在蔗皮中最高,叶中最低,前者是后者的19.7倍;在外源因子处理后0～48 h,ScAPX基因的表达受水杨酸(salicylic acid,SA)、茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)、过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)、脱落酸(abscisic acid,ABA)、氯化钠(sodium chloride,NaCl)和聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)诱导,SA、MeJA和H2O2处理后的ScAPX 转录本积累量峰值较外源激素(ABA)和环境(NaCl和PEG)胁迫早.前者的ScAPX转录本变化呈现出胁迫初期积累量增加,达到峰值后又逐步下降的特点;在同样的测试时间(处理后24 h)内,ABA、NaCl和PEG处理后ScAPX转录本在达到峰值后未见下降.虽然在外源胁迫下,ScAPX表达量变化存在明显差异,但其表达均表现出正响应上述外源因子对甘蔗的胁迫.本研究为后续深入鉴定该基因的功能与进一步应用提供基础资料.
항배혈산과양화물매(ascorbate peroxidase,APX)시청제활성양(reactive oxygen species,ROS)적중요매류.본연구대침자접충흑분균(Sporisorium scitamineum)후적항、감기인형감자(Saccharum officinarum)진행APX활성측정.결과표명,감자접충흑수병균48h내,항병품충(애성05-179) APX활성현저고우감병품충(류성03-182) (P＜0.05).차조전자극륭기술,결합RT-PCR방법,종감자중분리도일개APX기인,병명명위ScAPX(GenBank등록호:KJ7565501).생물신식학분석현시,ScAPX기인전장l 171bp,포함일개1 038 bp적완정개방열독광,편마345개안기산.ScAPX편마적단백불함신호태,추측기위비분비단백,정위우선립체기질화협록체기질중적개솔분별위91.1％화88.7％.실시형광정량PCR검측결과현시,ScAPX재감자근、아、협、자피화자수중균유표체,위조성형표체기인,표체량재자피중최고,협중최저,전자시후자적19.7배;재외원인자처리후0～48 h,ScAPX기인적표체수수양산(salicylic acid,SA)、말리산갑지(methyl jasmonate,MeJA)、과양화경(hydrogen peroxide,H2O2)、탈락산(abscisic acid,ABA)、록화납(sodium chloride,NaCl)화취을이순(polyethylene glycol,PEG)유도,SA、MeJA화H2O2처리후적ScAPX 전록본적루량봉치교외원격소(ABA)화배경(NaCl화PEG)협박조.전자적ScAPX전록본변화정현출협박초기적루량증가,체도봉치후우축보하강적특점;재동양적측시시간(처리후24 h)내,ABA、NaCl화PEG처리후ScAPX전록본재체도봉치후미견하강.수연재외원협박하,ScAPX표체량변화존재명현차이,단기표체균표현출정향응상술외원인자대감자적협박.본연구위후속심입감정해기인적공능여진일보응용제공기출자료.