农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2015年
1期
32-40
,共9页
罗天宽%刘斌%吴海涛%徐谦%裘波音%邹晓霞%李俊星%陈利萍
囉天寬%劉斌%吳海濤%徐謙%裘波音%鄒曉霞%李俊星%陳利萍
라천관%류빈%오해도%서겸%구파음%추효하%리준성%진리평
榨菜%orf451%瘤状茎膨大%多聚半乳糖醛酸酶%基因表达
榨菜%orf451%瘤狀莖膨大%多聚半乳糖醛痠酶%基因錶達
자채%orf451%류상경팽대%다취반유당철산매%기인표체
Tuber mustard%orf451%Swelling of tumor-like stems%Polygalacturonase%Gene expression
为了更好地了解榨菜(Brassica juncea var.tumida)瘤状茎膨大的分子机制,以榨菜不同发育时期的瘤状茎为材料,分离到一个cDNA-AFLP差异片段,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆了包含有该差异片段的基因的cDNA全长(命名为orf451,GenBank登录号:KM213220),并对其序列及编码的蛋白质进行分析.结果表明,orf451的cDNA全长1 512 bp,最大开放阅读框为1 356 bp,与编码多聚半乳糖醛酸酶/糖苷水解酶的基因有很高的相似性(90％),其编码的蛋白具备多聚半乳糖醛酸酶(果胶裂解酶)和糖苷水解酶的功能域.利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对orf451的时空表达进行分析,发现在榨菜瘤状茎形成初期orf451在表皮和外皮层表达量最高,推测orf451参与了榨菜瘤状茎膨大过程中表皮与外皮层多聚糖的水解.本研究为阐明瘤状茎生长发育调控机制提供理论依据.
為瞭更好地瞭解榨菜(Brassica juncea var.tumida)瘤狀莖膨大的分子機製,以榨菜不同髮育時期的瘤狀莖為材料,分離到一箇cDNA-AFLP差異片段,利用cDNA末耑快速擴增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技術剋隆瞭包含有該差異片段的基因的cDNA全長(命名為orf451,GenBank登錄號:KM213220),併對其序列及編碼的蛋白質進行分析.結果錶明,orf451的cDNA全長1 512 bp,最大開放閱讀框為1 356 bp,與編碼多聚半乳糖醛痠酶/糖苷水解酶的基因有很高的相似性(90％),其編碼的蛋白具備多聚半乳糖醛痠酶(果膠裂解酶)和糖苷水解酶的功能域.利用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)技術對orf451的時空錶達進行分析,髮現在榨菜瘤狀莖形成初期orf451在錶皮和外皮層錶達量最高,推測orf451參與瞭榨菜瘤狀莖膨大過程中錶皮與外皮層多聚糖的水解.本研究為闡明瘤狀莖生長髮育調控機製提供理論依據.
위료경호지료해자채(Brassica juncea var.tumida)류상경팽대적분자궤제,이자채불동발육시기적류상경위재료,분리도일개cDNA-AFLP차이편단,이용cDNA말단쾌속확증(rapid amplification of cDNA ends,RACE)기술극륭료포함유해차이편단적기인적cDNA전장(명명위orf451,GenBank등록호:KM213220),병대기서렬급편마적단백질진행분석.결과표명,orf451적cDNA전장1 512 bp,최대개방열독광위1 356 bp,여편마다취반유당철산매/당감수해매적기인유흔고적상사성(90％),기편마적단백구비다취반유당철산매(과효렬해매)화당감수해매적공능역.이용실시형광정량PCR(qRT-PCR)기술대orf451적시공표체진행분석,발현재자채류상경형성초기orf451재표피화외피층표체량최고,추측orf451삼여료자채류상경팽대과정중표피여외피층다취당적수해.본연구위천명류상경생장발육조공궤제제공이론의거.
