农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2015年
1期
12-19
,共8页
王芳%刘超%吴江生%刘克德
王芳%劉超%吳江生%劉剋德
왕방%류초%오강생%류극덕
AtRabD2b%保守半胱氨酸%异戊二烯化修饰%定位%功能
AtRabD2b%保守半胱氨痠%異戊二烯化脩飾%定位%功能
AtRabD2b%보수반광안산%이무이희화수식%정위%공능
AtRabD2b%Conserved cystein residues%Prenylation%Localization%Function
Rab蛋白羧基末端含有保守的半胱氨酸残基,是蛋白质翻译后进行异戊二烯化修饰的位点.本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)突变型RabD2b为对象,用定点突变的方法,获得AtRabD2b羧基末端第199位和200位保守半胱氨酸残基共同缺失的突变基因AtRabD2b△CC,及第199位保守半胱氨酸残基突变为丝氨酸的基因AtRabD 2bCI99S.将突变基因瞬时转化烟草(Nicotiana tabacum)叶片或稳定转化拟南芥,发现两种突变蛋白都定位在细胞质中,而野生型AtRabD2b蛋白则主要定位在高尔基体上.酵母温敏突变体ypt1产生的温度致死表型能够通过转化AtRabD2b获得恢复,而突变后的AtRabD2b均丧失了恢复功能.结果表明,拟南芥AtRabD2b羧基末端单个保守半胱氨酸残基的突变或两个保守半胱氨酸的缺失都会影响其亚细胞定位和功能发挥.本研究为深入开展植物Rab蛋白的异戊二烯化修饰机制提供参考资料.
Rab蛋白羧基末耑含有保守的半胱氨痠殘基,是蛋白質翻譯後進行異戊二烯化脩飾的位點.本研究以擬南芥(Arabidopsis thaliana)突變型RabD2b為對象,用定點突變的方法,穫得AtRabD2b羧基末耑第199位和200位保守半胱氨痠殘基共同缺失的突變基因AtRabD2b△CC,及第199位保守半胱氨痠殘基突變為絲氨痠的基因AtRabD 2bCI99S.將突變基因瞬時轉化煙草(Nicotiana tabacum)葉片或穩定轉化擬南芥,髮現兩種突變蛋白都定位在細胞質中,而野生型AtRabD2b蛋白則主要定位在高爾基體上.酵母溫敏突變體ypt1產生的溫度緻死錶型能夠通過轉化AtRabD2b穫得恢複,而突變後的AtRabD2b均喪失瞭恢複功能.結果錶明,擬南芥AtRabD2b羧基末耑單箇保守半胱氨痠殘基的突變或兩箇保守半胱氨痠的缺失都會影響其亞細胞定位和功能髮揮.本研究為深入開展植物Rab蛋白的異戊二烯化脩飾機製提供參攷資料.
Rab단백최기말단함유보수적반광안산잔기,시단백질번역후진행이무이희화수식적위점.본연구이의남개(Arabidopsis thaliana)돌변형RabD2b위대상,용정점돌변적방법,획득AtRabD2b최기말단제199위화200위보수반광안산잔기공동결실적돌변기인AtRabD2b△CC,급제199위보수반광안산잔기돌변위사안산적기인AtRabD 2bCI99S.장돌변기인순시전화연초(Nicotiana tabacum)협편혹은정전화의남개,발현량충돌변단백도정위재세포질중,이야생형AtRabD2b단백칙주요정위재고이기체상.효모온민돌변체ypt1산생적온도치사표형능구통과전화AtRabD2b획득회복,이돌변후적AtRabD2b균상실료회복공능.결과표명,의남개AtRabD2b최기말단단개보수반광안산잔기적돌변혹량개보수반광안산적결실도회영향기아세포정위화공능발휘.본연구위심입개전식물Rab단백적이무이희화수식궤제제공삼고자료.
