农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2015年
1期
126-134
,共9页
张丽%曹应龙%王海英%梁晓声%卢长明
張麗%曹應龍%王海英%樑曉聲%盧長明
장려%조응룡%왕해영%량효성%로장명
实时荧光定量PCR(qRT-PCR)%转基因成分%定量检测%标准曲线%数据分析
實時熒光定量PCR(qRT-PCR)%轉基因成分%定量檢測%標準麯線%數據分析
실시형광정량PCR(qRT-PCR)%전기인성분%정량검측%표준곡선%수거분석
Real-time quantitative PCR (qRT-PCR)%Genetically modified ingredients%Quantitative detection%Standard curve%Data analysis
在利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测转基因成分的含量时,数据分析的规范化与标准化对保证实验数据的准确性及实验室间数据的可比性具有重要意义.本研究以转基因玉米(Zea mays)NK603为研究材料,分析了分别以qRT-PCR中3次平行反应的单个Ct值和3次平行反应Ct值的平均值所绘制标准曲线的差异;分析了分别以盲样3次平行反应的Ct平均值和3次平行反应的拷贝数平均值(算术平均值或几何平均值)计算转基因成分含量的差异;并研究了结果准确性判定的方法.结果表明,标准曲线应基于单个Ct值;在计算转基因成分的含量时,Ct值应取算术平均值,拷贝数应取几何平均值;最后通过比较样品的测量结果与标准值之间的差异是否显著(U△＞△m,表明测量结果的平均值与样品的标准值无显著差别)来判断实验结果的可靠性.本研究为转基因产品检测中qRT-PCR实验数据处理的标准化提供了参考资料.
在利用實時熒光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)檢測轉基因成分的含量時,數據分析的規範化與標準化對保證實驗數據的準確性及實驗室間數據的可比性具有重要意義.本研究以轉基因玉米(Zea mays)NK603為研究材料,分析瞭分彆以qRT-PCR中3次平行反應的單箇Ct值和3次平行反應Ct值的平均值所繪製標準麯線的差異;分析瞭分彆以盲樣3次平行反應的Ct平均值和3次平行反應的拷貝數平均值(算術平均值或幾何平均值)計算轉基因成分含量的差異;併研究瞭結果準確性判定的方法.結果錶明,標準麯線應基于單箇Ct值;在計算轉基因成分的含量時,Ct值應取算術平均值,拷貝數應取幾何平均值;最後通過比較樣品的測量結果與標準值之間的差異是否顯著(U△＞△m,錶明測量結果的平均值與樣品的標準值無顯著差彆)來判斷實驗結果的可靠性.本研究為轉基因產品檢測中qRT-PCR實驗數據處理的標準化提供瞭參攷資料.
재이용실시형광정량PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)검측전기인성분적함량시,수거분석적규범화여표준화대보증실험수거적준학성급실험실간수거적가비성구유중요의의.본연구이전기인옥미(Zea mays)NK603위연구재료,분석료분별이qRT-PCR중3차평행반응적단개Ct치화3차평행반응Ct치적평균치소회제표준곡선적차이;분석료분별이맹양3차평행반응적Ct평균치화3차평행반응적고패수평균치(산술평균치혹궤하평균치)계산전기인성분함량적차이;병연구료결과준학성판정적방법.결과표명,표준곡선응기우단개Ct치;재계산전기인성분적함량시,Ct치응취산술평균치,고패수응취궤하평균치;최후통과비교양품적측량결과여표준치지간적차이시부현저(U△＞△m,표명측량결과적평균치여양품적표준치무현저차별)래판단실험결과적가고성.본연구위전기인산품검측중qRT-PCR실험수거처리적표준화제공료삼고자료.
