农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2015年
1期
80-88
,共9页
赵旺生%罗军%张天颖%余康
趙旺生%囉軍%張天穎%餘康
조왕생%라군%장천영%여강
西农萨能奶山羊%脂联素受体基因(AdipoR1)%基因克隆%组织表达
西農薩能奶山羊%脂聯素受體基因(AdipoR1)%基因剋隆%組織錶達
서농살능내산양%지련소수체기인(AdipoR1)%기인극륭%조직표체
Xinong Saanen dairy goat%Adiponectin receptor 1 (AdipoR1)%Gene cloning%Tissue expression
脂联素(adiponectin)具有改善胰岛素敏感性,调节脂肪酸代谢和参与细胞增殖和分化的功能.本研究参考GenBank中已收录的牛Bos taurus)、小鼠(Mus musculus)和人(Homo sapiens)等物种脂联素受体1基因(adiponectin receptor 1,AdipoR1)序列的同源比对结果,设计和合成PCR扩增引物,采用反转录PCR和RACE技术,分离并克隆了西农萨能奶山羊(Capra hircus)AdipoR1的cDNA序列.结果显示,AdipoR1全长2 032 bp (GenBank登录号:HQ846828),包括开放阅读框(open reading frame,ORF)1 128 bp,3'非翻译区(untranslated regions,UTR) 719 bp和5'UTR 185 bp,该基因编码375个氨基酸.通过氨基酸序列比对发现,山羊与牛、猪(Sus scrofa)、小鼠和人的AdipoR1相似性较高,均在95%以上.蛋白质结构分析表明,其蛋白质的分子量为42.44 kD,等电点为7.19,含7个跨膜结构域,并且整个序列中不含信号肽.组织表达分析显示,该基因在肺中的表达量最高,小肠次之,在心脏中表达量最低,而其余8个组织中AdipoR1 mRNA水平变化则比较平缓;奶山羊乳腺组织中AdipoR1表达量分析表明,AdipoR1的表达量在干奶期和泌乳盛期乳腺组织差异显著(P<0.05).用不同浓度胰岛素(insulin)和催乳素(prolactin)处理奶山羊乳腺上皮细胞,结果发现,用胰岛素处理乳腺上皮细胞后,AdipoR1的表达量下调,在胰岛素浓度为50 nmo/L时效果最明显(P<0.01);用催乳素处理乳腺上皮细胞后,AdipoR1的表达量上升,在浓度为100 mg/mL时作用最明显(P<0.05),表明该基因在奶山羊乳腺上皮细胞中具有一定的调控作用.本研究为进一步揭示AdipoR1基因在奶山羊乳腺组织中的功能提供基础资料.
脂聯素(adiponectin)具有改善胰島素敏感性,調節脂肪痠代謝和參與細胞增殖和分化的功能.本研究參攷GenBank中已收錄的牛Bos taurus)、小鼠(Mus musculus)和人(Homo sapiens)等物種脂聯素受體1基因(adiponectin receptor 1,AdipoR1)序列的同源比對結果,設計和閤成PCR擴增引物,採用反轉錄PCR和RACE技術,分離併剋隆瞭西農薩能奶山羊(Capra hircus)AdipoR1的cDNA序列.結果顯示,AdipoR1全長2 032 bp (GenBank登錄號:HQ846828),包括開放閱讀框(open reading frame,ORF)1 128 bp,3'非翻譯區(untranslated regions,UTR) 719 bp和5'UTR 185 bp,該基因編碼375箇氨基痠.通過氨基痠序列比對髮現,山羊與牛、豬(Sus scrofa)、小鼠和人的AdipoR1相似性較高,均在95%以上.蛋白質結構分析錶明,其蛋白質的分子量為42.44 kD,等電點為7.19,含7箇跨膜結構域,併且整箇序列中不含信號肽.組織錶達分析顯示,該基因在肺中的錶達量最高,小腸次之,在心髒中錶達量最低,而其餘8箇組織中AdipoR1 mRNA水平變化則比較平緩;奶山羊乳腺組織中AdipoR1錶達量分析錶明,AdipoR1的錶達量在榦奶期和泌乳盛期乳腺組織差異顯著(P<0.05).用不同濃度胰島素(insulin)和催乳素(prolactin)處理奶山羊乳腺上皮細胞,結果髮現,用胰島素處理乳腺上皮細胞後,AdipoR1的錶達量下調,在胰島素濃度為50 nmo/L時效果最明顯(P<0.01);用催乳素處理乳腺上皮細胞後,AdipoR1的錶達量上升,在濃度為100 mg/mL時作用最明顯(P<0.05),錶明該基因在奶山羊乳腺上皮細胞中具有一定的調控作用.本研究為進一步揭示AdipoR1基因在奶山羊乳腺組織中的功能提供基礎資料.
지련소(adiponectin)구유개선이도소민감성,조절지방산대사화삼여세포증식화분화적공능.본연구삼고GenBank중이수록적우Bos taurus)、소서(Mus musculus)화인(Homo sapiens)등물충지련소수체1기인(adiponectin receptor 1,AdipoR1)서렬적동원비대결과,설계화합성PCR확증인물,채용반전록PCR화RACE기술,분리병극륭료서농살능내산양(Capra hircus)AdipoR1적cDNA서렬.결과현시,AdipoR1전장2 032 bp (GenBank등록호:HQ846828),포괄개방열독광(open reading frame,ORF)1 128 bp,3'비번역구(untranslated regions,UTR) 719 bp화5'UTR 185 bp,해기인편마375개안기산.통과안기산서렬비대발현,산양여우、저(Sus scrofa)、소서화인적AdipoR1상사성교고,균재95%이상.단백질결구분석표명,기단백질적분자량위42.44 kD,등전점위7.19,함7개과막결구역,병차정개서렬중불함신호태.조직표체분석현시,해기인재폐중적표체량최고,소장차지,재심장중표체량최저,이기여8개조직중AdipoR1 mRNA수평변화칙비교평완;내산양유선조직중AdipoR1표체량분석표명,AdipoR1적표체량재간내기화비유성기유선조직차이현저(P<0.05).용불동농도이도소(insulin)화최유소(prolactin)처리내산양유선상피세포,결과발현,용이도소처리유선상피세포후,AdipoR1적표체량하조,재이도소농도위50 nmo/L시효과최명현(P<0.01);용최유소처리유선상피세포후,AdipoR1적표체량상승,재농도위100 mg/mL시작용최명현(P<0.05),표명해기인재내산양유선상피세포중구유일정적조공작용.본연구위진일보게시AdipoR1기인재내산양유선조직중적공능제공기출자료.