农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2015年
1期
52-60
,共9页
孙越%刘秀霞%李丽莉%官赟赟%张举仁
孫越%劉秀霞%李麗莉%官赟赟%張舉仁
손월%류수하%리려리%관빈빈%장거인
5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶基因(epsps)%Bt cry1AcM基因%转基因玉米%抗亚洲玉米螟%抗草甘膦%稳定遗传
5-烯醇丙酮痠莽草痠-3-燐痠閤酶基因(epsps)%Bt cry1AcM基因%轉基因玉米%抗亞洲玉米螟%抗草甘膦%穩定遺傳
5-희순병동산망초산-3-린산합매기인(epsps)%Bt cry1AcM기인%전기인옥미%항아주옥미명%항초감련%은정유전
5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase gene (epsps)%Bt cry1AcM gene%Transgenic maize%Asiatic corn borer-resistance%Glyphosate-tolerance%Genetic stablity
5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶基因(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,epsps)是一个高抗草甘膦的基因,苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)的杀虫蛋白基因(Bt基因)cry1AcM是一个能在单子叶植物中高效表达的抗亚洲玉米螟基因.为了获得具有抗虫、抗除草剂优良复合性状的转基因玉米,本研究构建出质粒pCAMBIA 1302-P35S∷epsps-Tnos-Pubi::cry1AcM-Tnos,通过农杆菌(Agrobacterium tumefacien)介导的玉米(Zea mays)茎尖遗传转化法将目标基因转入玉米.通过分子检测、草甘膦抗性筛选和田间接种亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis (Guenée))试验筛选出转基因株系,在此基础上进行了转基因植株室内抗亚洲玉米螟试验和田间草甘膦抗性分析,并采用RT-PCR检测和Western blot方法确定了抗虫蛋白在转基因植株中稳定表达.从大量转基因株系中优选出6个遗传稳定且抗亚洲玉米螟、抗除草剂草甘膦的转基因玉米株系,这些株系的抗亚洲玉米螟、抗草甘膦特性完全满足大田应用的需求.综上所述,将改造后的Bt抗虫基因cry 1AcM和抗草甘膦基因epsps一同转入玉米,赋予两种玉米骨干自交系植株抗玉米螟、抗草甘膦特性,为我国抗亚洲玉米螟抗草甘膦转基因玉米的大面积推广培育出了优良自交系.
5-烯醇式丙酮痠莽草痠-3-燐痠閤酶基因(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,epsps)是一箇高抗草甘膦的基因,囌雲金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis)的殺蟲蛋白基因(Bt基因)cry1AcM是一箇能在單子葉植物中高效錶達的抗亞洲玉米螟基因.為瞭穫得具有抗蟲、抗除草劑優良複閤性狀的轉基因玉米,本研究構建齣質粒pCAMBIA 1302-P35S∷epsps-Tnos-Pubi::cry1AcM-Tnos,通過農桿菌(Agrobacterium tumefacien)介導的玉米(Zea mays)莖尖遺傳轉化法將目標基因轉入玉米.通過分子檢測、草甘膦抗性篩選和田間接種亞洲玉米螟(Ostrinia furnacalis (Guenée))試驗篩選齣轉基因株繫,在此基礎上進行瞭轉基因植株室內抗亞洲玉米螟試驗和田間草甘膦抗性分析,併採用RT-PCR檢測和Western blot方法確定瞭抗蟲蛋白在轉基因植株中穩定錶達.從大量轉基因株繫中優選齣6箇遺傳穩定且抗亞洲玉米螟、抗除草劑草甘膦的轉基因玉米株繫,這些株繫的抗亞洲玉米螟、抗草甘膦特性完全滿足大田應用的需求.綜上所述,將改造後的Bt抗蟲基因cry 1AcM和抗草甘膦基因epsps一同轉入玉米,賦予兩種玉米骨榦自交繫植株抗玉米螟、抗草甘膦特性,為我國抗亞洲玉米螟抗草甘膦轉基因玉米的大麵積推廣培育齣瞭優良自交繫.
5-희순식병동산망초산-3-린산합매기인(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,epsps)시일개고항초감련적기인,소운금아포간균(Bacillus thuringiensis)적살충단백기인(Bt기인)cry1AcM시일개능재단자협식물중고효표체적항아주옥미명기인.위료획득구유항충、항제초제우량복합성상적전기인옥미,본연구구건출질립pCAMBIA 1302-P35S∷epsps-Tnos-Pubi::cry1AcM-Tnos,통과농간균(Agrobacterium tumefacien)개도적옥미(Zea mays)경첨유전전화법장목표기인전입옥미.통과분자검측、초감련항성사선화전간접충아주옥미명(Ostrinia furnacalis (Guenée))시험사선출전기인주계,재차기출상진행료전기인식주실내항아주옥미명시험화전간초감련항성분석,병채용RT-PCR검측화Western blot방법학정료항충단백재전기인식주중은정표체.종대량전기인주계중우선출6개유전은정차항아주옥미명、항제초제초감련적전기인옥미주계,저사주계적항아주옥미명、항초감련특성완전만족대전응용적수구.종상소술,장개조후적Bt항충기인cry 1AcM화항초감련기인epsps일동전입옥미,부여량충옥미골간자교계식주항옥미명、항초감련특성,위아국항아주옥미명항초감련전기인옥미적대면적추엄배육출료우량자교계.