中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2014年
11期
40-43
,共4页
郭金玉%高志强%张鹤晓%张乐萃%吴丹
郭金玉%高誌彊%張鶴曉%張樂萃%吳丹
곽금옥%고지강%장학효%장악췌%오단
牟肠道病毒2型%重组表达%间接ELISA
牟腸道病毒2型%重組錶達%間接ELISA
모장도병독2형%중조표체%간접ELISA
根据2005年从北京某牛场分离得到的一株牛肠道病毒2型(BEV-2)毒株序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增BEV-2包含VP1(840bp)蛋白基因片段的VP1+(1 275 bp)序列,扩增产物克隆到pMD-T19,进行测序验证.验证该序列为目的片段后,将其克隆到表达载体pET-32a.重组质粒转化至Rosetta,经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示重组蛋白在大肠杆菌中高效表达.将重组蛋白作检测抗原包被酶标板,成功建立了检测牛肠道病毒2型抗体的间接ELISA方法.上述工作,为下一步BEV-2单克隆抗体的制备打下了基础.
根據2005年從北京某牛場分離得到的一株牛腸道病毒2型(BEV-2)毒株序列,設計特異性引物,採用RT-PCR方法擴增BEV-2包含VP1(840bp)蛋白基因片段的VP1+(1 275 bp)序列,擴增產物剋隆到pMD-T19,進行測序驗證.驗證該序列為目的片段後,將其剋隆到錶達載體pET-32a.重組質粒轉化至Rosetta,經IPTG誘導後,SDS-PAGE顯示重組蛋白在大腸桿菌中高效錶達.將重組蛋白作檢測抗原包被酶標闆,成功建立瞭檢測牛腸道病毒2型抗體的間接ELISA方法.上述工作,為下一步BEV-2單剋隆抗體的製備打下瞭基礎.
근거2005년종북경모우장분리득도적일주우장도병독2형(BEV-2)독주서렬,설계특이성인물,채용RT-PCR방법확증BEV-2포함VP1(840bp)단백기인편단적VP1+(1 275 bp)서렬,확증산물극륭도pMD-T19,진행측서험증.험증해서렬위목적편단후,장기극륭도표체재체pET-32a.중조질립전화지Rosetta,경IPTG유도후,SDS-PAGE현시중조단백재대장간균중고효표체.장중조단백작검측항원포피매표판,성공건립료검측우장도병독2형항체적간접ELISA방법.상술공작,위하일보BEV-2단극륭항체적제비타하료기출.
