畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
1期
82-85
,共4页
张陈量%涂宜强%高永安%刘苏君%刘滔涛%荀飞琼%白宇
張陳量%塗宜彊%高永安%劉囌君%劉滔濤%荀飛瓊%白宇
장진량%도의강%고영안%류소군%류도도%순비경%백우
猪流行性腹泻病毒%N基因%原核表达
豬流行性腹瀉病毒%N基因%原覈錶達
저류행성복사병독%N기인%원핵표체
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以猪流行性腹泻病毒(PEDV)标准株CV777为参考毒株设计特异性引物,利用RT-PCR从PEDV浙江流行毒株ZJ-WZ中扩增出核衣壳蛋白(N)基因.将其克隆至pBluscriptⅡKS(+/-)多克隆位点区,经过PCR检测、EcoR Ⅰ单酶切以及测序鉴定,结果表明成功克隆获得N基因.将N基因亚克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a-PEDV-N,经IPTG诱导、SDS-PAGE和Western blot分析表明,N蛋白获得高效表达.本试验为深入研究PEDV的N蛋白免疫学特性及功能奠定了基础.
以豬流行性腹瀉病毒(PEDV)標準株CV777為參攷毒株設計特異性引物,利用RT-PCR從PEDV浙江流行毒株ZJ-WZ中擴增齣覈衣殼蛋白(N)基因.將其剋隆至pBluscriptⅡKS(+/-)多剋隆位點區,經過PCR檢測、EcoR Ⅰ單酶切以及測序鑒定,結果錶明成功剋隆穫得N基因.將N基因亞剋隆到原覈錶達載體pET-30a(+)中,構建重組錶達質粒pET-30a-PEDV-N,經IPTG誘導、SDS-PAGE和Western blot分析錶明,N蛋白穫得高效錶達.本試驗為深入研究PEDV的N蛋白免疫學特性及功能奠定瞭基礎.
이저류행성복사병독(PEDV)표준주CV777위삼고독주설계특이성인물,이용RT-PCR종PEDV절강류행독주ZJ-WZ중확증출핵의각단백(N)기인.장기극륭지pBluscriptⅡKS(+/-)다극륭위점구,경과PCR검측、EcoR Ⅰ단매절이급측서감정,결과표명성공극륭획득N기인.장N기인아극륭도원핵표체재체pET-30a(+)중,구건중조표체질립pET-30a-PEDV-N,경IPTG유도、SDS-PAGE화Western blot분석표명,N단백획득고효표체.본시험위심입연구PEDV적N단백면역학특성급공능전정료기출.
