畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
1期
49-52
,共4页
陈晓勇%孙洪新%向海%敦伟涛
陳曉勇%孫洪新%嚮海%敦偉濤
진효용%손홍신%향해%돈위도
AS-PCR%SNP分型%绵羊%BMPR1B%16S rRNA%tRNA-His
AS-PCR%SNP分型%綿羊%BMPR1B%16S rRNA%tRNA-His
AS-PCR%SNP분형%면양%BMPR1B%16S rRNA%tRNA-His
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为了在绵羊核基因和线粒体基因中建立简便、快速、准确的SNP分型技术,选择骨形态发生蛋白受体1B基因(BMPR1B)(核基因)A746G突变位点和线粒体基因16S rRNA基因(T1112C)、tRNA-His基因(C11606T)突变位点,对BMPR1B A746G采用三引物等位基因特异性PCR,结果每个样品使用2次扩增即可判定基因型,减少了限制性内切酶的使用.T1112C和C11606T采用四引物等位基因特异性PCR进行分型,T1112C位点检测中,所有样品均能扩增出569 bp最长片段的外引物产物,扩增出349 bp片段的样品为TT野生型,扩增出263 bp片段的样品为CC突变型,没有异质性.C11606T位点检测中,所有样品均能扩增出572 bp最长片段的外引物产物,扩增出408 bp的片段为CC野生型,扩增出213 bp的片段为TT野生型,没有异质性.结果表明四引物等位基因特异性PCR技术可以用于线粒体基因组SNP分型.
為瞭在綿羊覈基因和線粒體基因中建立簡便、快速、準確的SNP分型技術,選擇骨形態髮生蛋白受體1B基因(BMPR1B)(覈基因)A746G突變位點和線粒體基因16S rRNA基因(T1112C)、tRNA-His基因(C11606T)突變位點,對BMPR1B A746G採用三引物等位基因特異性PCR,結果每箇樣品使用2次擴增即可判定基因型,減少瞭限製性內切酶的使用.T1112C和C11606T採用四引物等位基因特異性PCR進行分型,T1112C位點檢測中,所有樣品均能擴增齣569 bp最長片段的外引物產物,擴增齣349 bp片段的樣品為TT野生型,擴增齣263 bp片段的樣品為CC突變型,沒有異質性.C11606T位點檢測中,所有樣品均能擴增齣572 bp最長片段的外引物產物,擴增齣408 bp的片段為CC野生型,擴增齣213 bp的片段為TT野生型,沒有異質性.結果錶明四引物等位基因特異性PCR技術可以用于線粒體基因組SNP分型.
위료재면양핵기인화선립체기인중건립간편、쾌속、준학적SNP분형기술,선택골형태발생단백수체1B기인(BMPR1B)(핵기인)A746G돌변위점화선립체기인16S rRNA기인(T1112C)、tRNA-His기인(C11606T)돌변위점,대BMPR1B A746G채용삼인물등위기인특이성PCR,결과매개양품사용2차확증즉가판정기인형,감소료한제성내절매적사용.T1112C화C11606T채용사인물등위기인특이성PCR진행분형,T1112C위점검측중,소유양품균능확증출569 bp최장편단적외인물산물,확증출349 bp편단적양품위TT야생형,확증출263 bp편단적양품위CC돌변형,몰유이질성.C11606T위점검측중,소유양품균능확증출572 bp최장편단적외인물산물,확증출408 bp적편단위CC야생형,확증출213 bp적편단위TT야생형,몰유이질성.결과표명사인물등위기인특이성PCR기술가이용우선립체기인조SNP분형.
