安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
3期
25-28
,共4页
张丽君%刘龙龙%张建珍%孙毅%康国帅%周建平%崔林
張麗君%劉龍龍%張建珍%孫毅%康國帥%週建平%崔林
장려군%류룡룡%장건진%손의%강국수%주건평%최림
植物转化%燕麦%玉米%高粱
植物轉化%燕麥%玉米%高粱
식물전화%연맥%옥미%고량
Plant transformation%Oat%Maize%Sorghum
[目的]优化农杆菌介导创伤胚转化的方法,提高转化率,培育具有特定功能的转基因品种,改善作物的生存能力和生态环境适应力.[方法]参照农杆菌划胚介导植物萌发种子基因转化方法,以燕麦、玉米和高粱的萌发种子为试验材料,农杆菌菌株LBA4404(含质粒P3301ubiAc)侵染转化燕麦、玉米和高粱的萌发种子,优化转化条件,探索燕麦、玉米和高粱遗传转化体系,探讨菌液浓度、种子萌发时间、超声波功率、乙酰丁香酮和草丁膦浓度对3种作物的影响并进行比较分析.[结果]农杆菌菌液浓度为0.6> OD600≥0.4时转化效果最佳;第1次超声波功率为900 W,处理时间为10 min;第2次超声波功率为200 W,处理时间为4 min效果最佳.转化效率最高;添加乙酰丁香酮对燕麦、高粱和玉米的发芽有明显促进作用,但转化效果有明显区别;燕麦、玉米和高粱的转化植株对草丁膦的耐受性差异不大,与非转化植株相比,0.8 mg/L除草剂胁迫下燕麦、玉米和高粱种子萌发受到一定程度的抑制.用1 mg/L除草剂溶液对T0和T1代转化植株幼苗进行筛选,转化植株的存活率高于对照.[结论]经除草剂筛选和PCR对L和T1代幼苗检测,初步证明获得了转化植株.
[目的]優化農桿菌介導創傷胚轉化的方法,提高轉化率,培育具有特定功能的轉基因品種,改善作物的生存能力和生態環境適應力.[方法]參照農桿菌劃胚介導植物萌髮種子基因轉化方法,以燕麥、玉米和高粱的萌髮種子為試驗材料,農桿菌菌株LBA4404(含質粒P3301ubiAc)侵染轉化燕麥、玉米和高粱的萌髮種子,優化轉化條件,探索燕麥、玉米和高粱遺傳轉化體繫,探討菌液濃度、種子萌髮時間、超聲波功率、乙酰丁香酮和草丁膦濃度對3種作物的影響併進行比較分析.[結果]農桿菌菌液濃度為0.6> OD600≥0.4時轉化效果最佳;第1次超聲波功率為900 W,處理時間為10 min;第2次超聲波功率為200 W,處理時間為4 min效果最佳.轉化效率最高;添加乙酰丁香酮對燕麥、高粱和玉米的髮芽有明顯促進作用,但轉化效果有明顯區彆;燕麥、玉米和高粱的轉化植株對草丁膦的耐受性差異不大,與非轉化植株相比,0.8 mg/L除草劑脅迫下燕麥、玉米和高粱種子萌髮受到一定程度的抑製.用1 mg/L除草劑溶液對T0和T1代轉化植株幼苗進行篩選,轉化植株的存活率高于對照.[結論]經除草劑篩選和PCR對L和T1代幼苗檢測,初步證明穫得瞭轉化植株.
[목적]우화농간균개도창상배전화적방법,제고전화솔,배육구유특정공능적전기인품충,개선작물적생존능력화생태배경괄응력.[방법]삼조농간균화배개도식물맹발충자기인전화방법,이연맥、옥미화고량적맹발충자위시험재료,농간균균주LBA4404(함질립P3301ubiAc)침염전화연맥、옥미화고량적맹발충자,우화전화조건,탐색연맥、옥미화고량유전전화체계,탐토균액농도、충자맹발시간、초성파공솔、을선정향동화초정련농도대3충작물적영향병진행비교분석.[결과]농간균균액농도위0.6> OD600≥0.4시전화효과최가;제1차초성파공솔위900 W,처리시간위10 min;제2차초성파공솔위200 W,처리시간위4 min효과최가.전화효솔최고;첨가을선정향동대연맥、고량화옥미적발아유명현촉진작용,단전화효과유명현구별;연맥、옥미화고량적전화식주대초정련적내수성차이불대,여비전화식주상비,0.8 mg/L제초제협박하연맥、옥미화고량충자맹발수도일정정도적억제.용1 mg/L제초제용액대T0화T1대전화식주유묘진행사선,전화식주적존활솔고우대조.[결론]경제초제사선화PCR대L화T1대유묘검측,초보증명획득료전화식주.