浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2014年
6期
1469-1477
,共9页
王京波%孙敬敬%廖智%申望
王京波%孫敬敬%廖智%申望
왕경파%손경경%료지%신망
Cystatin%三疣梭子蟹%血细胞%免疫调节
Cystatin%三疣梭子蟹%血細胞%免疫調節
Cystatin%삼우사자해%혈세포%면역조절
Cystatin%Portunus trituberculatus%hemocytes%immunomodulatory
半胱氨酸蛋白酶抑制剂Cystatin超家族在机体中参与包括免疫调节在内的多种生理病理功能.通过对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血细胞全长cDNA文库随机测序,鉴定了一个新颖的Ⅰ型Cystatin基因,命名为PtCystatin.PtCystatin全长cDNA 960 bp,开放阅读框372 bp,编码123个氨基酸残基,N端19个氨基酸残基为信号肽.PtCystatin成熟肽有104个氨基酸残基,理论分子量为11640.30 Da,等电点pI为5.24,有一个Cystatin结构域.PtCystatin与Ⅰ型Cystatin序列同源性高,人Cystatin A与靶酶结合的2个基序在Pt-Cystatin中也保守(M26VPGG30,Q71VVAG75),C端无二硫键.组织表达差异分析显示PtCystatin在胃中表达量高,其次为肝胰脏、鳃、血细胞,肌肉和眼中表达量低.致病菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)诱导3h,血细胞PtCystatin表达量小幅上调1.21倍(P<0.05);而在6h和12 h显著下调,分别为0.47倍(P<0.01)和0.57倍(P <0.05);24 h恢复到诱导前水平,提示PtCystatin可能参与三疣梭子蟹的免疫防御反应,是一个免疫相关基因.
半胱氨痠蛋白酶抑製劑Cystatin超傢族在機體中參與包括免疫調節在內的多種生理病理功能.通過對三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血細胞全長cDNA文庫隨機測序,鑒定瞭一箇新穎的Ⅰ型Cystatin基因,命名為PtCystatin.PtCystatin全長cDNA 960 bp,開放閱讀框372 bp,編碼123箇氨基痠殘基,N耑19箇氨基痠殘基為信號肽.PtCystatin成熟肽有104箇氨基痠殘基,理論分子量為11640.30 Da,等電點pI為5.24,有一箇Cystatin結構域.PtCystatin與Ⅰ型Cystatin序列同源性高,人Cystatin A與靶酶結閤的2箇基序在Pt-Cystatin中也保守(M26VPGG30,Q71VVAG75),C耑無二硫鍵.組織錶達差異分析顯示PtCystatin在胃中錶達量高,其次為肝胰髒、鰓、血細胞,肌肉和眼中錶達量低.緻病菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)誘導3h,血細胞PtCystatin錶達量小幅上調1.21倍(P<0.05);而在6h和12 h顯著下調,分彆為0.47倍(P<0.01)和0.57倍(P <0.05);24 h恢複到誘導前水平,提示PtCystatin可能參與三疣梭子蟹的免疫防禦反應,是一箇免疫相關基因.
반광안산단백매억제제Cystatin초가족재궤체중삼여포괄면역조절재내적다충생리병리공능.통과대삼우사자해(Portunus trituberculatus)혈세포전장cDNA문고수궤측서,감정료일개신영적Ⅰ형Cystatin기인,명명위PtCystatin.PtCystatin전장cDNA 960 bp,개방열독광372 bp,편마123개안기산잔기,N단19개안기산잔기위신호태.PtCystatin성숙태유104개안기산잔기,이론분자량위11640.30 Da,등전점pI위5.24,유일개Cystatin결구역.PtCystatin여Ⅰ형Cystatin서렬동원성고,인Cystatin A여파매결합적2개기서재Pt-Cystatin중야보수(M26VPGG30,Q71VVAG75),C단무이류건.조직표체차이분석현시PtCystatin재위중표체량고,기차위간이장、새、혈세포,기육화안중표체량저.치병균부용혈호균(Vibrio parahaemolyticus)유도3h,혈세포PtCystatin표체량소폭상조1.21배(P<0.05);이재6h화12 h현저하조,분별위0.47배(P<0.01)화0.57배(P <0.05);24 h회복도유도전수평,제시PtCystatin가능삼여삼우사자해적면역방어반응,시일개면역상관기인.