CAJ | 학술논문

背景：目前文献报道的软骨RNA提取有多钟方法，国内文献报道多为经典Trizol法，在实验中发现该方法提取的RNA并不能满足后续实验的需要。 　　目的：探索不同方法提取SD大鼠软骨组织总RNA的区别。 　　方法：选取3月龄SD大鼠9只，分别采用Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout试剂盒和经典Trizol法对软骨组织进行总RNA提取，并通过RNA琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性，以探寻软骨总RNA最佳提取方案。 　　结果与结论：Trizol法提取的RNA A260/A280值为1.58，说明纯度不高；RNAout法提取的RNA，由于软骨含有大量的蛋白多糖和胶原，也不能满足后续实验的需要；RNeasy? Mini Kit法和肝(Trizol)法提取RNA的A260/A280值分别为2.00和1.98，说明提取的总RNA或核酸的纯度高。RNA的完整性电泳结果显示， RNeasy? Mini Kit法、RNAout法和肝(Trizol)法可见28 s、18 s及5 s条带，而Trizol法未见任何条带， RNAout法28 s和18 s条带不清楚。结果提示Rneasy Lipid Tissue Kit法获得的总RNA纯度高、完整性和稳定性好，并能成功反转录合成双链cDNA，而RNAout试剂盒和经典 Trizol法获得的总 RNA不能满足后续实验需要。
배경：목전문헌보도적연골RNA제취유다종방법，국내문헌보도다위경전Trizol법，재실험중발현해방법제취적RNA병불능만족후속실험적수요。 　　목적：탐색불동방법제취SD대서연골조직총RNA적구별。 　　방법：선취3월령SD대서9지，분별채용Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout시제합화경전Trizol법대연골조직진행총RNA제취，병통과RNA경지당응효전영검측RNA적완정성，이탐심연골총RNA최가제취방안。 　　결과여결론：Trizol법제취적RNA A260/A280치위1.58，설명순도불고；RNAout법제취적RNA，유우연골함유대량적단백다당화효원，야불능만족후속실험적수요；RNeasy? Mini Kit법화간(Trizol)법제취RNA적A260/A280치분별위2.00화1.98，설명제취적총RNA혹핵산적순도고。RNA적완정성전영결과현시， RNeasy? Mini Kit법、RNAout법화간(Trizol)법가견28 s、18 s급5 s조대，이Trizol법미견임하조대， RNAout법28 s화18 s조대불청초。결과제시Rneasy Lipid Tissue Kit법획득적총RNA순도고、완정성화은정성호，병능성공반전록합성쌍련cDNA，이RNAout시제합화경전 Trizol법획득적총 RNA불능만족후속실험수요。