山东畜牧兽医
山東畜牧獸醫
산동축목수의
SHANDONG JOURNAL OF ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY SCIENCE
2015年
1期
1-2,3
,共3页
伪狂犬病毒%VP5%原核基因表达%抗体鉴定
偽狂犬病毒%VP5%原覈基因錶達%抗體鑒定
위광견병독%VP5%원핵기인표체%항체감정
以全长PRV基因组DNA为模板，PCR法扩增截短的伪狂犬病毒VP5基因，将其克隆至 pET-28a载体中，构建重组原核表达质粒pET-28a-VP5，转化至大肠杆菌BL21中，并诱导表达；表达产物经 SDS-PAGE及Western blot鉴定后，进行纯化。结果表明，重组表达蛋白可以与PRV阳性血清及标签HIS单克隆抗体发生特异性反应。通过成功构建了PRV截短VP5基因重组原核表达质粒 pET-28a-VP5，原核表达并纯化了重组蛋白，为伪狂犬病毒特异性诊断抗原的开发、疫苗的研制及细胞生物学研究奠定了基础。
以全長PRV基因組DNA為模闆，PCR法擴增截短的偽狂犬病毒VP5基因，將其剋隆至 pET-28a載體中，構建重組原覈錶達質粒pET-28a-VP5，轉化至大腸桿菌BL21中，併誘導錶達；錶達產物經 SDS-PAGE及Western blot鑒定後，進行純化。結果錶明，重組錶達蛋白可以與PRV暘性血清及標籤HIS單剋隆抗體髮生特異性反應。通過成功構建瞭PRV截短VP5基因重組原覈錶達質粒 pET-28a-VP5，原覈錶達併純化瞭重組蛋白，為偽狂犬病毒特異性診斷抗原的開髮、疫苗的研製及細胞生物學研究奠定瞭基礎。
이전장PRV기인조DNA위모판，PCR법확증절단적위광견병독VP5기인，장기극륭지 pET-28a재체중，구건중조원핵표체질립pET-28a-VP5，전화지대장간균BL21중，병유도표체；표체산물경 SDS-PAGE급Western blot감정후，진행순화。결과표명，중조표체단백가이여PRV양성혈청급표첨HIS단극륭항체발생특이성반응。통과성공구건료PRV절단VP5기인중조원핵표체질립 pET-28a-VP5，원핵표체병순화료중조단백，위위광견병독특이성진단항원적개발、역묘적연제급세포생물학연구전정료기출。
