西南国防医药
西南國防醫藥
서남국방의약
MEDICAL JOURNAL OF NATIONAL DEFENDING FORCES IN SOUTHWEST CHINA
2015年
1期
1-4
,共4页
唐兵%速晓华%陈劲松%李刚%李德%杨永健%朱峻
唐兵%速曉華%陳勁鬆%李剛%李德%楊永健%硃峻
당병%속효화%진경송%리강%리덕%양영건%주준
血管紧张素%2型受体%树突状细胞%动脉粥样硬化
血管緊張素%2型受體%樹突狀細胞%動脈粥樣硬化
혈관긴장소%2형수체%수돌상세포%동맥죽양경화
angiotensin%type 2 receptor%dendritic cells%atherosclerosis
目的 研究血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因表达对树突状细胞(DC)成熟及免疫功能的影响,探讨AT2R参与动脉粥样硬化斑块进展的免疫炎性反应机制.方法 用免疫磁珠分离纯化C57BL/6J小鼠骨髓细胞,体外培养为DC,再转染携带绿色荧光蛋白的AT2R基因重组腺病毒载体(pAdCMV/AT2R)或空病毒载体(pAd-GFP),分为对照组、脂多糖组、pAd-GFP组、pAdCMV/AT2R组及pAdCMV/AT2R+ AT2RB组(AT2R拮抗剂).用荧光显微镜、RT-PCR、Western印迹检测绿色荧光及AT2R mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测DC表面标志CD86和MHCⅡ的表达率;MTT检测DC刺激T淋巴细胞增殖能力;ELISA检测细胞因子白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ(IFN-γ)水平.结果 DC转染病毒后有绿色荧光及AT2RmRNA和蛋白的表达,pAdCMV/AT2R组CD86和MHCⅡ的表达、T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌量都较对照组高(P＜0.01),但比脂多糖组显著降低(P＜0.05或P＜0.01),pAdCMV/AT2R+ AT2RB组上述变化也显著高于对照组(P＜0.01),但与脂多糖组比较无显著差异(P＞0.05).结论 DC表达AT2R基因,AT2R能抑制DC成熟诱导的局部免疫炎性反应,推测AT2R可能介导抑制动脉粥样斑块的进展.
目的 研究血管緊張素Ⅱ2型受體(AT2R)基因錶達對樹突狀細胞(DC)成熟及免疫功能的影響,探討AT2R參與動脈粥樣硬化斑塊進展的免疫炎性反應機製.方法 用免疫磁珠分離純化C57BL/6J小鼠骨髓細胞,體外培養為DC,再轉染攜帶綠色熒光蛋白的AT2R基因重組腺病毒載體(pAdCMV/AT2R)或空病毒載體(pAd-GFP),分為對照組、脂多糖組、pAd-GFP組、pAdCMV/AT2R組及pAdCMV/AT2R+ AT2RB組(AT2R拮抗劑).用熒光顯微鏡、RT-PCR、Western印跡檢測綠色熒光及AT2R mRNA和蛋白錶達水平;流式細胞術檢測DC錶麵標誌CD86和MHCⅡ的錶達率;MTT檢測DC刺激T淋巴細胞增殖能力;ELISA檢測細胞因子白細胞介素-12(IL-12)和榦擾素-γ(IFN-γ)水平.結果 DC轉染病毒後有綠色熒光及AT2RmRNA和蛋白的錶達,pAdCMV/AT2R組CD86和MHCⅡ的錶達、T淋巴細胞增殖和細胞因子分泌量都較對照組高(P＜0.01),但比脂多糖組顯著降低(P＜0.05或P＜0.01),pAdCMV/AT2R+ AT2RB組上述變化也顯著高于對照組(P＜0.01),但與脂多糖組比較無顯著差異(P＞0.05).結論 DC錶達AT2R基因,AT2R能抑製DC成熟誘導的跼部免疫炎性反應,推測AT2R可能介導抑製動脈粥樣斑塊的進展.
목적 연구혈관긴장소Ⅱ2형수체(AT2R)기인표체대수돌상세포(DC)성숙급면역공능적영향,탐토AT2R삼여동맥죽양경화반괴진전적면역염성반응궤제.방법 용면역자주분리순화C57BL/6J소서골수세포,체외배양위DC,재전염휴대록색형광단백적AT2R기인중조선병독재체(pAdCMV/AT2R)혹공병독재체(pAd-GFP),분위대조조、지다당조、pAd-GFP조、pAdCMV/AT2R조급pAdCMV/AT2R+ AT2RB조(AT2R길항제).용형광현미경、RT-PCR、Western인적검측록색형광급AT2R mRNA화단백표체수평;류식세포술검측DC표면표지CD86화MHCⅡ적표체솔;MTT검측DC자격T림파세포증식능력;ELISA검측세포인자백세포개소-12(IL-12)화간우소-γ(IFN-γ)수평.결과 DC전염병독후유록색형광급AT2RmRNA화단백적표체,pAdCMV/AT2R조CD86화MHCⅡ적표체、T림파세포증식화세포인자분비량도교대조조고(P＜0.01),단비지다당조현저강저(P＜0.05혹P＜0.01),pAdCMV/AT2R+ AT2RB조상술변화야현저고우대조조(P＜0.01),단여지다당조비교무현저차이(P＞0.05).결론 DC표체AT2R기인,AT2R능억제DC성숙유도적국부면역염성반응,추측AT2R가능개도억제동맥죽양반괴적진전.
