中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2014年
51期
8301-8304
,共4页
连小峰%徐建广%曾炳芳%周蔚%孔维清%张涛%侯铁胜
連小峰%徐建廣%曾炳芳%週蔚%孔維清%張濤%侯鐵勝
련소봉%서건엄%증병방%주위%공유청%장도%후철성
组织构建%组织工程%许旺细胞%Lentivirus病毒%病毒载体%感染复数%转染效率%细胞培养%脊髓损伤%绿色荧光蛋白%国家自然科学基金
組織構建%組織工程%許旺細胞%Lentivirus病毒%病毒載體%感染複數%轉染效率%細胞培養%脊髓損傷%綠色熒光蛋白%國傢自然科學基金
조직구건%조직공정%허왕세포%Lentivirus병독%병독재체%감염복수%전염효솔%세포배양%척수손상%록색형광단백%국가자연과학기금
Subject headings:lentivirus%schwann cels%transfection%cels,cultured
背景:近年来研究较多的LV载体,因其强大的转染能力以及较高的转染效率等特点,在基因转染的实验中应用越来越广泛。<br> 目的:进一步验证Lentivirus载体在体外对原代许旺细胞的转染效率。<br> 方法:以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体,在体外分别以MOI值为1,5,10,20,40对原代大鼠许旺细胞进行转染,转染后第1,3,5,7,9天在荧光显微镜下观察Lentivirus携带的荧光表达情况,并在显微镜的计数方格内计算细胞的转染情况。发出绿色荧光的为转染成功的许旺细胞,否则认为没有转染病毒载体的,从而算出转染效率。<br> 结果与结论:在病毒转染3 d后,在各不同MOI值的培养孔中,均能观察到极少量的荧光反应,在第5天时,荧光数量较前明显增多。第7天时达到高峰,第9天的荧光数量与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看,不同的MOI值明显不同,MOI值为1时的转染效率约为45%,MOI值为5时为80%,MOI值为10时为90%, MOI值为20时为78%,MOI值为40时转染效率为70%。
揹景:近年來研究較多的LV載體,因其彊大的轉染能力以及較高的轉染效率等特點,在基因轉染的實驗中應用越來越廣汎。<br> 目的:進一步驗證Lentivirus載體在體外對原代許旺細胞的轉染效率。<br> 方法:以Lentivirus三質粒繫統構建病毒載體,在體外分彆以MOI值為1,5,10,20,40對原代大鼠許旺細胞進行轉染,轉染後第1,3,5,7,9天在熒光顯微鏡下觀察Lentivirus攜帶的熒光錶達情況,併在顯微鏡的計數方格內計算細胞的轉染情況。髮齣綠色熒光的為轉染成功的許旺細胞,否則認為沒有轉染病毒載體的,從而算齣轉染效率。<br> 結果與結論:在病毒轉染3 d後,在各不同MOI值的培養孔中,均能觀察到極少量的熒光反應,在第5天時,熒光數量較前明顯增多。第7天時達到高峰,第9天的熒光數量與第7天變化不明顯。從細胞轉染效率來看,不同的MOI值明顯不同,MOI值為1時的轉染效率約為45%,MOI值為5時為80%,MOI值為10時為90%, MOI值為20時為78%,MOI值為40時轉染效率為70%。
배경:근년래연구교다적LV재체,인기강대적전염능력이급교고적전염효솔등특점,재기인전염적실험중응용월래월엄범。<br> 목적:진일보험증Lentivirus재체재체외대원대허왕세포적전염효솔。<br> 방법:이Lentivirus삼질립계통구건병독재체,재체외분별이MOI치위1,5,10,20,40대원대대서허왕세포진행전염,전염후제1,3,5,7,9천재형광현미경하관찰Lentivirus휴대적형광표체정황,병재현미경적계수방격내계산세포적전염정황。발출록색형광적위전염성공적허왕세포,부칙인위몰유전염병독재체적,종이산출전염효솔。<br> 결과여결론:재병독전염3 d후,재각불동MOI치적배양공중,균능관찰도겁소량적형광반응,재제5천시,형광수량교전명현증다。제7천시체도고봉,제9천적형광수량여제7천변화불명현。종세포전염효솔래간,불동적MOI치명현불동,MOI치위1시적전염효솔약위45%,MOI치위5시위80%,MOI치위10시위90%, MOI치위20시위78%,MOI치위40시전염효솔위70%。