中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2014年
50期
8168-8173
,共6页
马丽君%范恒%马晓娜%魏军%李玉奎
馬麗君%範恆%馬曉娜%魏軍%李玉奎
마려군%범항%마효나%위군%리옥규
干细胞%诱导%人胎盘间充质干细胞%人早期胚胎脑组织蛋白提取物%神经细胞%分化%宁夏自然科学基金
榦細胞%誘導%人胎盤間充質榦細胞%人早期胚胎腦組織蛋白提取物%神經細胞%分化%寧夏自然科學基金
간세포%유도%인태반간충질간세포%인조기배태뇌조직단백제취물%신경세포%분화%저하자연과학기금
placenta%mesenchymal stem cels%neurons%embryonic induction%cel differentiation
背景:选择合适的诱导方法诱导人胎盘间充质干细胞分化为神经元样细胞是临床治疗神经损伤的关键。<br> 目的:在人胎盘间充质干细胞中加入商品化的人胚胎脑组织蛋白提取物,观察其诱导分化为神经元样细胞的可行性。<br> 方法:采用酶消化法分离培养人胎盘间充质干细胞,传至第3代,将人早期胚胎脑组织蛋白提取物加入诱导培养基培养6 d,加入浓度为20 nmol/L全反式维甲酸和500μg/L音猬因子培养3 d,换新的培养液,包含体积分数为10%胎牛血清,10μg/L脑源性神经营养因子,20μg/L神经胶质细胞源性神经营养因子,50μg/L胰岛素样生长因子Ⅱ型继续培养3 d。<br> 结果与结论:胎盘组织经酶消化后获得贴壁细胞,传至第2代细胞形态为梭形,成漩涡样生长,传至第3代细胞形态较均一。诱导后细胞经免疫细胞化学法检测均表达神经元特异性烯醇化酶、巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、神经丝蛋白、神经生长相关蛋白43;ELISA法检测细胞培养上清脑源性神经营养因子、神经营养因子3、神经营养因子4为阳性表达;RT-PCR检测细胞微管相关蛋白、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、神经生长相关蛋白43均为阳性表达。结果表明人胚胎脑组织蛋白提取物使人胎盘间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞。
揹景:選擇閤適的誘導方法誘導人胎盤間充質榦細胞分化為神經元樣細胞是臨床治療神經損傷的關鍵。<br> 目的:在人胎盤間充質榦細胞中加入商品化的人胚胎腦組織蛋白提取物,觀察其誘導分化為神經元樣細胞的可行性。<br> 方法:採用酶消化法分離培養人胎盤間充質榦細胞,傳至第3代,將人早期胚胎腦組織蛋白提取物加入誘導培養基培養6 d,加入濃度為20 nmol/L全反式維甲痠和500μg/L音猬因子培養3 d,換新的培養液,包含體積分數為10%胎牛血清,10μg/L腦源性神經營養因子,20μg/L神經膠質細胞源性神經營養因子,50μg/L胰島素樣生長因子Ⅱ型繼續培養3 d。<br> 結果與結論:胎盤組織經酶消化後穫得貼壁細胞,傳至第2代細胞形態為梭形,成漩渦樣生長,傳至第3代細胞形態較均一。誘導後細胞經免疫細胞化學法檢測均錶達神經元特異性烯醇化酶、巢蛋白、膠質纖維痠性蛋白、神經絲蛋白、神經生長相關蛋白43;ELISA法檢測細胞培養上清腦源性神經營養因子、神經營養因子3、神經營養因子4為暘性錶達;RT-PCR檢測細胞微管相關蛋白、神經元特異性烯醇化酶、神經絲蛋白、神經生長相關蛋白43均為暘性錶達。結果錶明人胚胎腦組織蛋白提取物使人胎盤間充質榦細胞誘導分化為神經元樣細胞。
배경:선택합괄적유도방법유도인태반간충질간세포분화위신경원양세포시림상치료신경손상적관건。<br> 목적:재인태반간충질간세포중가입상품화적인배태뇌조직단백제취물,관찰기유도분화위신경원양세포적가행성。<br> 방법:채용매소화법분리배양인태반간충질간세포,전지제3대,장인조기배태뇌조직단백제취물가입유도배양기배양6 d,가입농도위20 nmol/L전반식유갑산화500μg/L음위인자배양3 d,환신적배양액,포함체적분수위10%태우혈청,10μg/L뇌원성신경영양인자,20μg/L신경효질세포원성신경영양인자,50μg/L이도소양생장인자Ⅱ형계속배양3 d。<br> 결과여결론:태반조직경매소화후획득첩벽세포,전지제2대세포형태위사형,성선와양생장,전지제3대세포형태교균일。유도후세포경면역세포화학법검측균표체신경원특이성희순화매、소단백、효질섬유산성단백、신경사단백、신경생장상관단백43;ELISA법검측세포배양상청뇌원성신경영양인자、신경영양인자3、신경영양인자4위양성표체;RT-PCR검측세포미관상관단백、신경원특이성희순화매、신경사단백、신경생장상관단백43균위양성표체。결과표명인배태뇌조직단백제취물사인태반간충질간세포유도분화위신경원양세포。