中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2014年
50期
8151-8155
,共5页
冉玲%李晓倩%蒋欣益%邓锋%宋锦璘%曹礼
冉玲%李曉倩%蔣訢益%鄧鋒%宋錦璘%曹禮
염령%리효천%장흔익%산봉%송금린%조례
干细胞%培养%超声辐照%微泡%大鼠牙囊细胞%基因转染
榦細胞%培養%超聲輻照%微泡%大鼠牙囊細胞%基因轉染
간세포%배양%초성복조%미포%대서아낭세포%기인전염
dental sac%high-energy shock waves%genes%transfection
背景:利用超声波和微泡对比剂相互作用,产生空化效应和机械效应,破坏细胞膜的完整性,产生暂时性、可逆性的小孔,增加细胞膜的通透性,增强微泡载体对基因的转移,提高基因转染率。<br> 目的:探讨在超声波辐照下微泡对比剂介导pEGFP-N1质粒转染SD大鼠乳鼠牙囊细胞的效率及安全性。<br> 方法:体外原代培养新生SD大鼠牙囊细胞并传至第4代,在不同条件下采用pEGFP-N1质粒转染乳鼠牙囊细胞。以不同的超声辐照时间(15,30,45,60 s)和辐照强度(0.5,1 W/cm2)两两组合进行辐照,筛选较高转染效率的参数组合并应用于后续实验。实验分组为质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组、超声+微泡+质粒组和脂质体+质粒组。转染48 h后倒置荧光显微镜观察pEGFP表达,MTT法检测转染后的乳鼠牙囊细胞增殖抑制率。<br> 结果与结论:超声强度为0.5 W/cm 2且辐照时间为30 s时转染率明显高于其他超声参数组合。该条件下超声微泡介导pEGFP-N1质粒对乳鼠牙囊细胞的转染率高于传统脂质体介导的转染率,且对细胞活力无明显影响。提示超声微泡能安全、高效介导pEGFP-N1质粒转染大鼠牙囊细胞,其细胞生物学性质相对稳定,可为牙周组织工程提供一种较理想的基因转染方法。
揹景:利用超聲波和微泡對比劑相互作用,產生空化效應和機械效應,破壞細胞膜的完整性,產生暫時性、可逆性的小孔,增加細胞膜的通透性,增彊微泡載體對基因的轉移,提高基因轉染率。<br> 目的:探討在超聲波輻照下微泡對比劑介導pEGFP-N1質粒轉染SD大鼠乳鼠牙囊細胞的效率及安全性。<br> 方法:體外原代培養新生SD大鼠牙囊細胞併傳至第4代,在不同條件下採用pEGFP-N1質粒轉染乳鼠牙囊細胞。以不同的超聲輻照時間(15,30,45,60 s)和輻照彊度(0.5,1 W/cm2)兩兩組閤進行輻照,篩選較高轉染效率的參數組閤併應用于後續實驗。實驗分組為質粒組、微泡+質粒組、超聲+質粒組、超聲+微泡+質粒組和脂質體+質粒組。轉染48 h後倒置熒光顯微鏡觀察pEGFP錶達,MTT法檢測轉染後的乳鼠牙囊細胞增殖抑製率。<br> 結果與結論:超聲彊度為0.5 W/cm 2且輻照時間為30 s時轉染率明顯高于其他超聲參數組閤。該條件下超聲微泡介導pEGFP-N1質粒對乳鼠牙囊細胞的轉染率高于傳統脂質體介導的轉染率,且對細胞活力無明顯影響。提示超聲微泡能安全、高效介導pEGFP-N1質粒轉染大鼠牙囊細胞,其細胞生物學性質相對穩定,可為牙週組織工程提供一種較理想的基因轉染方法。
배경:이용초성파화미포대비제상호작용,산생공화효응화궤계효응,파배세포막적완정성,산생잠시성、가역성적소공,증가세포막적통투성,증강미포재체대기인적전이,제고기인전염솔。<br> 목적:탐토재초성파복조하미포대비제개도pEGFP-N1질립전염SD대서유서아낭세포적효솔급안전성。<br> 방법:체외원대배양신생SD대서아낭세포병전지제4대,재불동조건하채용pEGFP-N1질립전염유서아낭세포。이불동적초성복조시간(15,30,45,60 s)화복조강도(0.5,1 W/cm2)량량조합진행복조,사선교고전염효솔적삼수조합병응용우후속실험。실험분조위질립조、미포+질립조、초성+질립조、초성+미포+질립조화지질체+질립조。전염48 h후도치형광현미경관찰pEGFP표체,MTT법검측전염후적유서아낭세포증식억제솔。<br> 결과여결론:초성강도위0.5 W/cm 2차복조시간위30 s시전염솔명현고우기타초성삼수조합。해조건하초성미포개도pEGFP-N1질립대유서아낭세포적전염솔고우전통지질체개도적전염솔,차대세포활력무명현영향。제시초성미포능안전、고효개도pEGFP-N1질립전염대서아낭세포,기세포생물학성질상대은정,가위아주조직공정제공일충교이상적기인전염방법。