中国现代普通外科进展
中國現代普通外科進展
중국현대보통외과진전
CHINESE JOURNAL OF CURRENT ADVANCES IN GENERAL SURGERY
2014年
12期
925-929
,共5页
董小锋%王付海%李涛%徐宗珍%刘锋%修鹏%李杰
董小鋒%王付海%李濤%徐宗珍%劉鋒%脩鵬%李傑
동소봉%왕부해%리도%서종진%류봉%수붕%리걸
癌,肝细胞%缺氧诱导因子%自噬小体%shRNA%LC3-Ⅱ
癌,肝細胞%缺氧誘導因子%自噬小體%shRNA%LC3-Ⅱ
암,간세포%결양유도인자%자서소체%shRNA%LC3-Ⅱ
Carcinoma,hepatocyte%Hypoxia inducible factor%Autophagosome%shRNA%LC3-Ⅱ
目的:探讨缺氧环境肝癌细胞自噬的激活与HIF-1 α的关系.方法:将肝癌Bel-7402细胞分为常氧组、缺氧+Con shRNA组和缺氧+HIF-1 α shRNA组,将慢病毒介导的HIF-1 α shRNA转染细胞,继续培养36 h,Western blot检测HIF-1 α蛋白表达;吖啶橙(AO)荧光染色检测自噬溶酶体的形成,丹酰尸胺(MDC)荧光染色检测自噬小体的形成,并应用流式细胞技术定量自噬溶酶体或者自噬小体的荧光强度;Western blot检测自噬激活的标志蛋白LC3-Ⅱ表达.结果:慢病毒介导的HIF-1 αshRNA降低了缺氧诱导的肝癌细胞中HIF-1 α蛋白的生成(缺氧+HIF-1 α shRNA组vs缺氧+ConshRNA组,P＜0.01),HIF-1 α降低后,细胞中自噬小体及自噬溶酶体明显减少(缺氧+HIF-1 αshRNA组vs缺氧+Con shRNA组,P＜0.01),自噬激活标志蛋白LC3-Ⅱ明显减少(缺氧+HIF-1 αshRNA组vs Con shRNA组,P＜ 0.01).结论:缺氧环境下HIF-1 α介导了肝癌细胞自噬的激活.
目的:探討缺氧環境肝癌細胞自噬的激活與HIF-1 α的關繫.方法:將肝癌Bel-7402細胞分為常氧組、缺氧+Con shRNA組和缺氧+HIF-1 α shRNA組,將慢病毒介導的HIF-1 α shRNA轉染細胞,繼續培養36 h,Western blot檢測HIF-1 α蛋白錶達;吖啶橙(AO)熒光染色檢測自噬溶酶體的形成,丹酰尸胺(MDC)熒光染色檢測自噬小體的形成,併應用流式細胞技術定量自噬溶酶體或者自噬小體的熒光彊度;Western blot檢測自噬激活的標誌蛋白LC3-Ⅱ錶達.結果:慢病毒介導的HIF-1 αshRNA降低瞭缺氧誘導的肝癌細胞中HIF-1 α蛋白的生成(缺氧+HIF-1 α shRNA組vs缺氧+ConshRNA組,P＜0.01),HIF-1 α降低後,細胞中自噬小體及自噬溶酶體明顯減少(缺氧+HIF-1 αshRNA組vs缺氧+Con shRNA組,P＜0.01),自噬激活標誌蛋白LC3-Ⅱ明顯減少(缺氧+HIF-1 αshRNA組vs Con shRNA組,P＜ 0.01).結論:缺氧環境下HIF-1 α介導瞭肝癌細胞自噬的激活.
목적:탐토결양배경간암세포자서적격활여HIF-1 α적관계.방법:장간암Bel-7402세포분위상양조、결양+Con shRNA조화결양+HIF-1 α shRNA조,장만병독개도적HIF-1 α shRNA전염세포,계속배양36 h,Western blot검측HIF-1 α단백표체;아정등(AO)형광염색검측자서용매체적형성,단선시알(MDC)형광염색검측자서소체적형성,병응용류식세포기술정량자서용매체혹자자서소체적형광강도;Western blot검측자서격활적표지단백LC3-Ⅱ표체.결과:만병독개도적HIF-1 αshRNA강저료결양유도적간암세포중HIF-1 α단백적생성(결양+HIF-1 α shRNA조vs결양+ConshRNA조,P＜0.01),HIF-1 α강저후,세포중자서소체급자서용매체명현감소(결양+HIF-1 αshRNA조vs결양+Con shRNA조,P＜0.01),자서격활표지단백LC3-Ⅱ명현감소(결양+HIF-1 αshRNA조vs Con shRNA조,P＜ 0.01).결론:결양배경하HIF-1 α개도료간암세포자서적격활.
