中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2015年
3期
5-8
,共4页
文昌鸡%HSP70%克隆%表达
文昌鷄%HSP70%剋隆%錶達
문창계%HSP70%극륭%표체
采用RT-PCR扩增文昌鸡热休克蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)cDNA编码蛋白区,将扩增产物与pET-28a(+)载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序并进行生物信息学分析;构建pET-28a-cHSP70表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果显示,文昌鸡HSP70 cDNA编码蛋白区全长为1 905 bp,编码634个氨基酸.经IPTG诱导表达后,得到一个带组氨酸标签约80 ku的融合蛋白,采用抗His单克隆抗体进行Western blot得到一条约80 ku特异性抗体结合带,表明文昌鸡HSP70原核表达载体成功构建并表达.
採用RT-PCR擴增文昌鷄熱休剋蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)cDNA編碼蛋白區,將擴增產物與pET-28a(+)載體連接,重組質粒經PCR、酶切鑒定後測序併進行生物信息學分析;構建pET-28a-cHSP70錶達載體,經IPTG誘導錶達後,進行SDS-PAGE和Western blot分析.結果顯示,文昌鷄HSP70 cDNA編碼蛋白區全長為1 905 bp,編碼634箇氨基痠.經IPTG誘導錶達後,得到一箇帶組氨痠標籤約80 ku的融閤蛋白,採用抗His單剋隆抗體進行Western blot得到一條約80 ku特異性抗體結閤帶,錶明文昌鷄HSP70原覈錶達載體成功構建併錶達.
채용RT-PCR확증문창계열휴극단백70(Heat shock protein 70,HSP70)cDNA편마단백구,장확증산물여pET-28a(+)재체련접,중조질립경PCR、매절감정후측서병진행생물신식학분석;구건pET-28a-cHSP70표체재체,경IPTG유도표체후,진행SDS-PAGE화Western blot분석.결과현시,문창계HSP70 cDNA편마단백구전장위1 905 bp,편마634개안기산.경IPTG유도표체후,득도일개대조안산표첨약80 ku적융합단백,채용항His단극륭항체진행Western blot득도일조약80 ku특이성항체결합대,표명문창계HSP70원핵표체재체성공구건병표체.
