草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2015年
1期
99-106
,共8页
碱茅%6-磷酸海藻糖合成酶%基因表达%酵母
堿茅%6-燐痠海藻糖閤成酶%基因錶達%酵母
감모%6-린산해조당합성매%기인표체%효모
Puccinellia tenuiflora%6-trehalose phosphate synthase%gene expression%yeast
从碱茅酵母cDNA文库中经过NaCl、NaHCO3筛选,均得到长为1153 bp碱茅6-磷酸海藻糖合成酶基因(PutTPS)片段.通过3'End cDNA amplification方法获得基因缺失的3'序列,该基因全长3358 bp,编码882个氨基酸.氨基酸序列比较结果表明,PutTPS氨基酸序列与水稻、拟南芥、玉米等多种高等植物的TPS蛋白的同源性高达60％～90％.利用Northern blot技术,研究该基因的组织表达模式及NaCl、NaHCO3胁迫处理下基因的表达模式变化;同时对转pYES2-PutTPS基因酵母菌株进行盐、碱、氧化胁迫、渗透胁迫处理,观察其在逆境下的生存表现.结果表明,PutTPS具有组织表达特异性,其中在根和花中表达量最大;NaCl、NaHCO3会诱导PutTPS基因在根和叶中的上调表达;同时重组酵母菌株对盐碱、氧化、渗透胁迫及干旱等逆境的适应能力显著增强.以上研究结果表明,碱茅PutTPS基因与逆境之间具有一定的应答关系,并在植物适应环境逆境过程中起着重要的作用.
從堿茅酵母cDNA文庫中經過NaCl、NaHCO3篩選,均得到長為1153 bp堿茅6-燐痠海藻糖閤成酶基因(PutTPS)片段.通過3'End cDNA amplification方法穫得基因缺失的3'序列,該基因全長3358 bp,編碼882箇氨基痠.氨基痠序列比較結果錶明,PutTPS氨基痠序列與水稻、擬南芥、玉米等多種高等植物的TPS蛋白的同源性高達60％～90％.利用Northern blot技術,研究該基因的組織錶達模式及NaCl、NaHCO3脅迫處理下基因的錶達模式變化;同時對轉pYES2-PutTPS基因酵母菌株進行鹽、堿、氧化脅迫、滲透脅迫處理,觀察其在逆境下的生存錶現.結果錶明,PutTPS具有組織錶達特異性,其中在根和花中錶達量最大;NaCl、NaHCO3會誘導PutTPS基因在根和葉中的上調錶達;同時重組酵母菌株對鹽堿、氧化、滲透脅迫及榦旱等逆境的適應能力顯著增彊.以上研究結果錶明,堿茅PutTPS基因與逆境之間具有一定的應答關繫,併在植物適應環境逆境過程中起著重要的作用.
종감모효모cDNA문고중경과NaCl、NaHCO3사선,균득도장위1153 bp감모6-린산해조당합성매기인(PutTPS)편단.통과3'End cDNA amplification방법획득기인결실적3'서렬,해기인전장3358 bp,편마882개안기산.안기산서렬비교결과표명,PutTPS안기산서렬여수도、의남개、옥미등다충고등식물적TPS단백적동원성고체60％～90％.이용Northern blot기술,연구해기인적조직표체모식급NaCl、NaHCO3협박처리하기인적표체모식변화;동시대전pYES2-PutTPS기인효모균주진행염、감、양화협박、삼투협박처리,관찰기재역경하적생존표현.결과표명,PutTPS구유조직표체특이성,기중재근화화중표체량최대;NaCl、NaHCO3회유도PutTPS기인재근화협중적상조표체;동시중조효모균주대염감、양화、삼투협박급간한등역경적괄응능력현저증강.이상연구결과표명,감모PutTPS기인여역경지간구유일정적응답관계,병재식물괄응배경역경과정중기착중요적작용.
