CAJ | 학술논문

为提高黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)酶联免疫分析灵敏度,建立了基于异源策略的间接竞争酶联免疫分析(IC-ELISA)方法.首先采用黄曲霉毒素B1与羟基乙酸(glycolic acid,GA)进行衍生化反应,生成缩醛(AFB2-GA),即AFB1半抗原,质谱鉴定结果为ESI-MS:388.07[M+H]+,表明半抗原合成成功.然后采用活泼酯法,将AFB1半抗原羧基与牛血清白蛋白(BSA)的氨基经脱水反应实现化学共价偶联,得到AFB1人工抗原AFB2-GA-BSA.紫外扫描结果表明人工抗原AFB1特征吸收峰与BSA和AFB1的特征吸收峰有明显差异,BSA与黄曲霉毒素B1成功偶联,摩尔结合比分别为8.45∶1.最后将黄曲霉毒素B1人工抗原AFB2-GA-BSA作为包被原,利用黄曲霉毒素B1高特异性3G1抗体,建立了基于异源策略的IC-ELISA方法.利用该方法测定了3G1抗体的灵敏度,检测灵敏度达到0.3ng/mL,比同源ELISA方法检测灵敏度(1.6ng/mL)提高了81.25％,并将方法应用于花生中黄曲霉毒素的实际检测.测定结果与高效液相色谱法结果进行比对,结果符合曲线y=1.044 4x+0.090 2,R2 =0.975 1,说明该方法能满足花生中黄曲霉毒素快速筛查的测定准确度的要求.
위제고황곡매독소B1(aflatoxin B1,AFB1)매련면역분석령민도,건립료기우이원책략적간접경쟁매련면역분석(IC-ELISA)방법.수선채용황곡매독소B1여간기을산(glycolic acid,GA)진행연생화반응,생성축철(AFB2-GA),즉AFB1반항원,질보감정결과위ESI-MS:388.07[M+H]+,표명반항원합성성공.연후채용활발지법,장AFB1반항원최기여우혈청백단백(BSA)적안기경탈수반응실현화학공개우련,득도AFB1인공항원AFB2-GA-BSA.자외소묘결과표명인공항원AFB1특정흡수봉여BSA화AFB1적특정흡수봉유명현차이,BSA여황곡매독소B1성공우련,마이결합비분별위8.45∶1.최후장황곡매독소B1인공항원AFB2-GA-BSA작위포피원,이용황곡매독소B1고특이성3G1항체,건립료기우이원책략적IC-ELISA방법.이용해방법측정료3G1항체적령민도,검측령민도체도0.3ng/mL,비동원ELISA방법검측령민도(1.6ng/mL)제고료81.25％,병장방법응용우화생중황곡매독소적실제검측.측정결과여고효액상색보법결과진행비대,결과부합곡선y=1.044 4x+0.090 2,R2 =0.975 1,설명해방법능만족화생중황곡매독소쾌속사사적측정준학도적요구.