CAJ | 학술논문

目的：肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）是一类胞浆内富含Vitamin A脂滴的特殊类型的细胞，激活后的HSC胞浆中Vitamin A脂滴减少活消失，是研究肝纤维化疾病的良好素材。本研究欲改良HSC细胞的培养方法，并鉴别四种HSC细胞鉴定方法的有效性。方法采用含0.2 mM油酸的完全培养基对已培养传代的大鼠肝星状细胞进行培养。分别采用油红0染色、Vitamin A脂滴的紫外激发、a-SMA免疫组化、a-SMA免疫荧光四种方法对培养的HSC进行鉴定。结果用含0.2 mM油酸的完全培养基培养的大鼠肝星状细胞，细胞形态饱满，胞浆不因传代而减少，细胞形态维持稳定，油红O染色后可清晰显示未激活HSC内的脂滴；紫外激发下Vitamin A脂滴发出极易淬灭的蓝绿色荧光；以泡球蚴囊液为外源性刺激，使HSC激活，a-SMA免疫组化染色激活的HSC胞浆均可见棕黄色颗粒状沉淀；a-SMA免疫荧光显示激活的HSC细胞胞浆均可见FITC的激发的绿色荧光。结论含0.2 mM油酸的完全培养基可有效维持细胞形态。油红0染液、Vitamin A脂滴的紫外激发可有效鉴定未激活的HSC，a-SMA免疫组化、a-SMA免疫荧光方法是鉴别激活的HSC的有效方法。
목적：간성상세포（hepatic stellate cell，HSC）시일류포장내부함Vitamin A지적적특수류형적세포，격활후적HSC포장중Vitamin A지적감소활소실，시연구간섬유화질병적량호소재。본연구욕개량HSC세포적배양방법，병감별사충HSC세포감정방법적유효성。방법채용함0.2 mM유산적완전배양기대이배양전대적대서간성상세포진행배양。분별채용유홍0염색、Vitamin A지적적자외격발、a-SMA면역조화、a-SMA면역형광사충방법대배양적HSC진행감정。결과용함0.2 mM유산적완전배양기배양적대서간성상세포，세포형태포만，포장불인전대이감소，세포형태유지은정，유홍O염색후가청석현시미격활HSC내적지적；자외격발하Vitamin A지적발출겁역쉬멸적람록색형광；이포구유낭액위외원성자격，사HSC격활，a-SMA면역조화염색격활적HSC포장균가견종황색과립상침정；a-SMA면역형광현시격활적HSC세포포장균가견FITC적격발적록색형광。결론함0.2 mM유산적완전배양기가유효유지세포형태。유홍0염액、Vitamin A지적적자외격발가유효감정미격활적HSC，a-SMA면역조화、a-SMA면역형광방법시감별격활적HSC적유효방법。