中国酿造
中國釀造
중국양조
CHINA BREWING
2014年
12期
58-62
,共5页
陈永%林良才%肖冬光%田朝光
陳永%林良纔%肖鼕光%田朝光
진영%림량재%초동광%전조광
里氏木霉%RL-P37%同源重组%pyr4%5-氟乳清酸
裏氏木黴%RL-P37%同源重組%pyr4%5-氟乳清痠
리씨목매%RL-P37%동원중조%pyr4%5-불유청산
Trichoderma reesei%RL-P37%homologous recombination%pyr4%5-fluoroorotic acid
里氏木霉(Trichoderma reesei) RL-P37作为纤维素酶高产菌,被广泛地应用在工业蛋白的生产过程.从基因水平对工业菌株进行分子改造已经成为提升工业菌株生产性状的重要手段.因此,亟需构建适用于基因敲除以及外源蛋白表达的营养缺陷型菌株,特别是可用于基因无痕敲除的尿嘧啶营养缺陷型菌株.本研究以潮霉素为标记,成功构建了里氏木霉RL-P37尿嘧啶营养缺陷型菌株,并得到Southern验证.该菌株在含有1.5 mg/mL 5-氟乳清酸、2 mg/mL尿苷的MM培养基中可以正常生长,并且在不含有尿苷的MM培养基上不能生长.此外,利用粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)的pyr4基因对该突变体进行了回补.里氏木霉RL-P37尿嘧啶营养缺陷型菌株的构建为该菌纤维素酶表达和分泌的机理研究以及后续产酶性能分子改造奠定了物质基础.
裏氏木黴(Trichoderma reesei) RL-P37作為纖維素酶高產菌,被廣汎地應用在工業蛋白的生產過程.從基因水平對工業菌株進行分子改造已經成為提升工業菌株生產性狀的重要手段.因此,亟需構建適用于基因敲除以及外源蛋白錶達的營養缺陷型菌株,特彆是可用于基因無痕敲除的尿嘧啶營養缺陷型菌株.本研究以潮黴素為標記,成功構建瞭裏氏木黴RL-P37尿嘧啶營養缺陷型菌株,併得到Southern驗證.該菌株在含有1.5 mg/mL 5-氟乳清痠、2 mg/mL尿苷的MM培養基中可以正常生長,併且在不含有尿苷的MM培養基上不能生長.此外,利用粗糙脈孢菌(Neurospora crassa)的pyr4基因對該突變體進行瞭迴補.裏氏木黴RL-P37尿嘧啶營養缺陷型菌株的構建為該菌纖維素酶錶達和分泌的機理研究以及後續產酶性能分子改造奠定瞭物質基礎.
리씨목매(Trichoderma reesei) RL-P37작위섬유소매고산균,피엄범지응용재공업단백적생산과정.종기인수평대공업균주진행분자개조이경성위제승공업균주생산성상적중요수단.인차,극수구건괄용우기인고제이급외원단백표체적영양결함형균주,특별시가용우기인무흔고제적뇨밀정영양결함형균주.본연구이조매소위표기,성공구건료리씨목매RL-P37뇨밀정영양결함형균주,병득도Southern험증.해균주재함유1.5 mg/mL 5-불유청산、2 mg/mL뇨감적MM배양기중가이정상생장,병차재불함유뇨감적MM배양기상불능생장.차외,이용조조맥포균(Neurospora crassa)적pyr4기인대해돌변체진행료회보.리씨목매RL-P37뇨밀정영양결함형균주적구건위해균섬유소매표체화분비적궤리연구이급후속산매성능분자개조전정료물질기출.
