上海畜牧兽医通讯
上海畜牧獸醫通訊
상해축목수의통신
SHANGHAI JOURNAL OF ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY MEDICINE
2015年
1期
6-8
,共3页
周莉%高其双%陈志华%彭霞%卢顺
週莉%高其雙%陳誌華%彭霞%盧順
주리%고기쌍%진지화%팽하%로순
鸡防御素(GAL)%真核表达载体%PIRES2-EGFP%细胞转染
鷄防禦素(GAL)%真覈錶達載體%PIRES2-EGFP%細胞轉染
계방어소(GAL)%진핵표체재체%PIRES2-EGFP%세포전염
采用RT-PCR方法从15日龄的仔鸡肾组织的总RNA中扩增出鸡防御素基因(GAL-2)序列,然后将其亚克隆到载体pIRES2-EGFP构建成真核表达载体pIRES2-EGFP-GAL-2.经PCR鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性.将构建好的真核表达质粒转染到Marc145细胞中进行瞬时表达,荧光检测证实细胞转染成功.pIRES2-EGFP-GAL-2真核表达载体的成功构建为下一步在细胞水平研究GAL蛋白功能以及进一步将其开发为兽用生物制品奠定了基础.
採用RT-PCR方法從15日齡的仔鷄腎組織的總RNA中擴增齣鷄防禦素基因(GAL-2)序列,然後將其亞剋隆到載體pIRES2-EGFP構建成真覈錶達載體pIRES2-EGFP-GAL-2.經PCR鑒定、限製性內切酶酶切分析和剋隆片段序列測定、比較,證實瞭重組質粒的正確性.將構建好的真覈錶達質粒轉染到Marc145細胞中進行瞬時錶達,熒光檢測證實細胞轉染成功.pIRES2-EGFP-GAL-2真覈錶達載體的成功構建為下一步在細胞水平研究GAL蛋白功能以及進一步將其開髮為獸用生物製品奠定瞭基礎.
채용RT-PCR방법종15일령적자계신조직적총RNA중확증출계방어소기인(GAL-2)서렬,연후장기아극륭도재체pIRES2-EGFP구건성진핵표체재체pIRES2-EGFP-GAL-2.경PCR감정、한제성내절매매절분석화극륭편단서렬측정、비교,증실료중조질립적정학성.장구건호적진핵표체질립전염도Marc145세포중진행순시표체,형광검측증실세포전염성공.pIRES2-EGFP-GAL-2진핵표체재체적성공구건위하일보재세포수평연구GAL단백공능이급진일보장기개발위수용생물제품전정료기출.
