实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2015年
1期
37-40
,共4页
香港海鸥形菌%荧光PCR%HAND系统
香港海鷗形菌%熒光PCR%HAND繫統
향항해구형균%형광PCR%HAND계통
Laribacter hongkongensis%Real-time PCR%HAND system
目的 针对香港海鸥形菌,利用同源加尾系统(Homo Tag Assisted Non-Dimer,简称HAND)建立一种基于改良分子信标的荧光PCR检测方法,并对这种方法进行条件优化和评价. 方法 根据香港海鸥形菌的基因保守序列16S-rDNA基因设计探针和特异性引物,并在引物的5'端加上同源尾巴序列,减少或避免引物二聚体的形成,通过优化通用尾巴引物和特异性加尾引物的浓度与反应温度等PCR参数构建荧光PCR的反应体系. 结果 建立的基于HAND系统的改良分子信标PCR的检测体系引物二聚体明显减少,检出限达到20 CFU/ml. 结论 建立的基于HAND系统的改良分子信标荧光PCR检测方法具有检测时间短、灵敏度高、特异性好的优点,能够应用于香港海鸥形菌的快速筛查.
目的 針對香港海鷗形菌,利用同源加尾繫統(Homo Tag Assisted Non-Dimer,簡稱HAND)建立一種基于改良分子信標的熒光PCR檢測方法,併對這種方法進行條件優化和評價. 方法 根據香港海鷗形菌的基因保守序列16S-rDNA基因設計探針和特異性引物,併在引物的5'耑加上同源尾巴序列,減少或避免引物二聚體的形成,通過優化通用尾巴引物和特異性加尾引物的濃度與反應溫度等PCR參數構建熒光PCR的反應體繫. 結果 建立的基于HAND繫統的改良分子信標PCR的檢測體繫引物二聚體明顯減少,檢齣限達到20 CFU/ml. 結論 建立的基于HAND繫統的改良分子信標熒光PCR檢測方法具有檢測時間短、靈敏度高、特異性好的優點,能夠應用于香港海鷗形菌的快速篩查.
목적 침대향항해구형균,이용동원가미계통(Homo Tag Assisted Non-Dimer,간칭HAND)건립일충기우개량분자신표적형광PCR검측방법,병대저충방법진행조건우화화평개. 방법 근거향항해구형균적기인보수서렬16S-rDNA기인설계탐침화특이성인물,병재인물적5'단가상동원미파서렬,감소혹피면인물이취체적형성,통과우화통용미파인물화특이성가미인물적농도여반응온도등PCR삼수구건형광PCR적반응체계. 결과 건립적기우HAND계통적개량분자신표PCR적검측체계인물이취체명현감소,검출한체도20 CFU/ml. 결론 건립적기우HAND계통적개량분자신표형광PCR검측방법구유검측시간단、령민도고、특이성호적우점,능구응용우향항해구형균적쾌속사사.
