湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2014年
23期
5742-5744,5747
,共4页
田宇曦%刘晓艳%张志刚%杨自文
田宇晞%劉曉豔%張誌剛%楊自文
전우희%류효염%장지강%양자문
苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)%Cry1Ac%融合蛋白%玉米螟%活性比较
囌雲金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis)%Cry1Ac%融閤蛋白%玉米螟%活性比較
소운금아포간균(Bacillus thuringiensis)%Cry1Ac%융합단백%옥미명%활성비교
Bacillus thuringiensis%Cry1Ac%fusion protein%corn borer%activity comparison
通过PCR技术将2种不同来源的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringie ns is,简称Bt)cry1Ac蛋白基因克隆到大肠杆菌pGEX-6P-1表达载体,并转化到宿主菌BL21,采用IPTG进行诱导表达,并用亲和层析法进行融合蛋白的纯化,纯化后的蛋白质进行玉米螟的室内生物测定试验.结果表明,来自Bt菌株NBIN-866的Cry1Ac蛋白杀玉米螟的LC50为65.39 μg/mL,来自Bt菌株NBIC-380的Cry1Ac蛋白杀玉米螟的LC50为15.07 μg/mL,后者具有更高的杀虫活性.氨基酸序列比对发现来自菌株NBIC-380的Cry1Ac氨基酸序列的71位和393位都为丝氨酸S,而NBIN-866的都为脯氨酸P,推测这两个位点的氨基酸的变化可能是影响毒性大小的重要因素.
通過PCR技術將2種不同來源的囌雲金芽胞桿菌(Bacillus thuringie ns is,簡稱Bt)cry1Ac蛋白基因剋隆到大腸桿菌pGEX-6P-1錶達載體,併轉化到宿主菌BL21,採用IPTG進行誘導錶達,併用親和層析法進行融閤蛋白的純化,純化後的蛋白質進行玉米螟的室內生物測定試驗.結果錶明,來自Bt菌株NBIN-866的Cry1Ac蛋白殺玉米螟的LC50為65.39 μg/mL,來自Bt菌株NBIC-380的Cry1Ac蛋白殺玉米螟的LC50為15.07 μg/mL,後者具有更高的殺蟲活性.氨基痠序列比對髮現來自菌株NBIC-380的Cry1Ac氨基痠序列的71位和393位都為絲氨痠S,而NBIN-866的都為脯氨痠P,推測這兩箇位點的氨基痠的變化可能是影響毒性大小的重要因素.
통과PCR기술장2충불동래원적소운금아포간균(Bacillus thuringie ns is,간칭Bt)cry1Ac단백기인극륭도대장간균pGEX-6P-1표체재체,병전화도숙주균BL21,채용IPTG진행유도표체,병용친화층석법진행융합단백적순화,순화후적단백질진행옥미명적실내생물측정시험.결과표명,래자Bt균주NBIN-866적Cry1Ac단백살옥미명적LC50위65.39 μg/mL,래자Bt균주NBIC-380적Cry1Ac단백살옥미명적LC50위15.07 μg/mL,후자구유경고적살충활성.안기산서렬비대발현래자균주NBIC-380적Cry1Ac안기산서렬적71위화393위도위사안산S,이NBIN-866적도위포안산P,추측저량개위점적안기산적변화가능시영향독성대소적중요인소.
