中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2014年
6期
1667-1672
,共6页
林全德%房佰俊%周健%张艳莉%刘阳%王超%赵俊梅%宋永平
林全德%房佰俊%週健%張豔莉%劉暘%王超%趙俊梅%宋永平
림전덕%방백준%주건%장염리%류양%왕초%조준매%송영평
再生障碍性贫血%三氧化二砷%环孢素-A%间充质干细胞%诱导分化
再生障礙性貧血%三氧化二砷%環孢素-A%間充質榦細胞%誘導分化
재생장애성빈혈%삼양화이신%배포소-A%간충질간세포%유도분화
aplastic anemia%arsenic trioxide%cyclosporine-A%mesenchymal stem cells%differentiation
本研究旨在探讨三氧化二砷(As2O3)对再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者骨髓间充质干细胞(BM-MSC)成脂与成骨分化失衡的调控作用.分离纯化AA患者BM-MSC,分别置于成脂与成骨诱导分化培养体系,在相应培养体系中分别加入As2O3、环孢霉素A(CsA)、As2O3联合CsA及不加药,As2O3的药物浓度为0.001μmol/ml,CsA的药物浓度为2.5 mmol/ml.将细胞相应分为As2O3组、CsA组、联合组和对照组,采用细胞形态学观察、油红O染色、Von-Kossa染色及RT-PCR等检测方法,检测相应分化标志.结果显示,在向成脂诱导分化方面,As2O3组的脂肪细胞分化率为(18.3±1.9)％,低于CsA组的(91.8±2.7)％及对照组的(92.1±1.2)％(P＜0.05),而与联合组的(8.3±1.9)％相比,则未见明显差异(P＞0.05),但CsA组的脂肪细胞分化率要高于联合组(P＜0.05),CsA组与对照组相比则未见明显差异.RT-PCR检测结果显示,As2O3组的LPL-mRNA表达水平分要低于CsA组及对照组(P＜0.05),而与联合组相比,则未见明显差异(P＞0.05),但CsA组的LPL-mRNA表达水平分要高于联合组(P＜0.05).通过Von-Kossa染色检测发现,在成骨诱导培养14 d后,在As2O3组、联合组可见明显钙盐沉积,而CsA组及对照组则未观察到明显钙盐沉积现象.RT-PCR检测结果显示,As2 O3组的OST-mRNA表达水平要高于CsA组及对照组(P＜0.05),而与联合组相比,则未见明显差异(P＞0.05),但CsA组的表达水平要低于联合组(P＜0.05).结论:As2O3可以抑制AA患者BM-MSC向脂肪细胞分化,并可增强其向成骨细胞分化,CsA对AA患者BM-MSC向成骨细胞分化无明显促进作用.
本研究旨在探討三氧化二砷(As2O3)對再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA)患者骨髓間充質榦細胞(BM-MSC)成脂與成骨分化失衡的調控作用.分離純化AA患者BM-MSC,分彆置于成脂與成骨誘導分化培養體繫,在相應培養體繫中分彆加入As2O3、環孢黴素A(CsA)、As2O3聯閤CsA及不加藥,As2O3的藥物濃度為0.001μmol/ml,CsA的藥物濃度為2.5 mmol/ml.將細胞相應分為As2O3組、CsA組、聯閤組和對照組,採用細胞形態學觀察、油紅O染色、Von-Kossa染色及RT-PCR等檢測方法,檢測相應分化標誌.結果顯示,在嚮成脂誘導分化方麵,As2O3組的脂肪細胞分化率為(18.3±1.9)％,低于CsA組的(91.8±2.7)％及對照組的(92.1±1.2)％(P＜0.05),而與聯閤組的(8.3±1.9)％相比,則未見明顯差異(P＞0.05),但CsA組的脂肪細胞分化率要高于聯閤組(P＜0.05),CsA組與對照組相比則未見明顯差異.RT-PCR檢測結果顯示,As2O3組的LPL-mRNA錶達水平分要低于CsA組及對照組(P＜0.05),而與聯閤組相比,則未見明顯差異(P＞0.05),但CsA組的LPL-mRNA錶達水平分要高于聯閤組(P＜0.05).通過Von-Kossa染色檢測髮現,在成骨誘導培養14 d後,在As2O3組、聯閤組可見明顯鈣鹽沉積,而CsA組及對照組則未觀察到明顯鈣鹽沉積現象.RT-PCR檢測結果顯示,As2 O3組的OST-mRNA錶達水平要高于CsA組及對照組(P＜0.05),而與聯閤組相比,則未見明顯差異(P＞0.05),但CsA組的錶達水平要低于聯閤組(P＜0.05).結論:As2O3可以抑製AA患者BM-MSC嚮脂肪細胞分化,併可增彊其嚮成骨細胞分化,CsA對AA患者BM-MSC嚮成骨細胞分化無明顯促進作用.
본연구지재탐토삼양화이신(As2O3)대재생장애성빈혈(aplastic anemia,AA)환자골수간충질간세포(BM-MSC)성지여성골분화실형적조공작용.분리순화AA환자BM-MSC,분별치우성지여성골유도분화배양체계,재상응배양체계중분별가입As2O3、배포매소A(CsA)、As2O3연합CsA급불가약,As2O3적약물농도위0.001μmol/ml,CsA적약물농도위2.5 mmol/ml.장세포상응분위As2O3조、CsA조、연합조화대조조,채용세포형태학관찰、유홍O염색、Von-Kossa염색급RT-PCR등검측방법,검측상응분화표지.결과현시,재향성지유도분화방면,As2O3조적지방세포분화솔위(18.3±1.9)％,저우CsA조적(91.8±2.7)％급대조조적(92.1±1.2)％(P＜0.05),이여연합조적(8.3±1.9)％상비,칙미견명현차이(P＞0.05),단CsA조적지방세포분화솔요고우연합조(P＜0.05),CsA조여대조조상비칙미견명현차이.RT-PCR검측결과현시,As2O3조적LPL-mRNA표체수평분요저우CsA조급대조조(P＜0.05),이여연합조상비,칙미견명현차이(P＞0.05),단CsA조적LPL-mRNA표체수평분요고우연합조(P＜0.05).통과Von-Kossa염색검측발현,재성골유도배양14 d후,재As2O3조、연합조가견명현개염침적,이CsA조급대조조칙미관찰도명현개염침적현상.RT-PCR검측결과현시,As2 O3조적OST-mRNA표체수평요고우CsA조급대조조(P＜0.05),이여연합조상비,칙미견명현차이(P＞0.05),단CsA조적표체수평요저우연합조(P＜0.05).결론:As2O3가이억제AA환자BM-MSC향지방세포분화,병가증강기향성골세포분화,CsA대AA환자BM-MSC향성골세포분화무명현촉진작용.
