CAJ | 학술논문

本研究通过转染miR-155抑制物(inhibitor)下调THP-1细胞的miR-155表达,探讨抑制miR-155表达对THP-1细胞增殖及凋亡的影响及其机制.通过X-treme GENE siRNA Transfection Reagent在THP-1细胞转染miR-155 inhibitor(THP-1I),同时设置未转染组(THP-1C)和转染对照组(THP-1 IC);应用实时定量PCR (RT-PCR)检测miR-155转染效率及转染后SHIP1的mRNA基因水平的表达,应用CCK-8法检测对细胞系增殖的影响,流式细胞术检测对凋亡的影响,Western blot法检测转染后的SHIP1、AKT、pAKT蛋白水平的基因表达.结果表明,与THP-1C和THP-1IC相比,THP-1I的miR-155表达水平明显降低(P＜0.05);抑制miR-155可导致THP-1细胞的凋亡率明显增高(P＜0.05);抑制miR-155对THP-1细胞的SHIP1 mRNA含量无明显影响,但导致SHIP1蛋白水平明显升高(P＜0.05),提示miR-155对THP-1细胞的SHIP1可能存在翻译水平的调节;miR-155抑制尽管未导致总AKT(TAKT)的蛋白含量变化,但pAKT蛋白水平明显降低(P＜0.05).结论:抑制miR-155表达可能通过增加SHIP1蛋白含量和抑制PBK/AKT信号途径促进THP-1细胞凋亡,提示抑制miR-155可能成为抗白血病治疗的新策略.
본연구통과전염miR-155억제물(inhibitor)하조THP-1세포적miR-155표체,탐토억제miR-155표체대THP-1세포증식급조망적영향급기궤제.통과X-treme GENE siRNA Transfection Reagent재THP-1세포전염miR-155 inhibitor(THP-1I),동시설치미전염조(THP-1C)화전염대조조(THP-1 IC);응용실시정량PCR (RT-PCR)검측miR-155전염효솔급전염후SHIP1적mRNA기인수평적표체,응용CCK-8법검측대세포계증식적영향,류식세포술검측대조망적영향,Western blot법검측전염후적SHIP1、AKT、pAKT단백수평적기인표체.결과표명,여THP-1C화THP-1IC상비,THP-1I적miR-155표체수평명현강저(P＜0.05);억제miR-155가도치THP-1세포적조망솔명현증고(P＜0.05);억제miR-155대THP-1세포적SHIP1 mRNA함량무명현영향,단도치SHIP1단백수평명현승고(P＜0.05),제시miR-155대THP-1세포적SHIP1가능존재번역수평적조절;miR-155억제진관미도치총AKT(TAKT)적단백함량변화,단pAKT단백수평명현강저(P＜0.05).결론:억제miR-155표체가능통과증가SHIP1단백함량화억제PBK/AKT신호도경촉진THP-1세포조망,제시억제miR-155가능성위항백혈병치료적신책략.