食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2015年
7期
71-78
,共8页
张旻%姜绍通%郑志%潘丽军%李兴江%罗水忠%吴学凤
張旻%薑紹通%鄭誌%潘麗軍%李興江%囉水忠%吳學鳳
장민%강소통%정지%반려군%리흥강%라수충%오학봉
米根霉%大肠杆菌%启动子探针载体%β-内酰胺酶%乳酸脱氢酶
米根黴%大腸桿菌%啟動子探針載體%β-內酰胺酶%乳痠脫氫酶
미근매%대장간균%계동자탐침재체%β-내선알매%유산탈경매
Rhizopus oryzae%Escherichia coli%promoter probe vector%β-lactamase%lactate dehydrogenase
从L-乳酸生产菌米根霉(Rhizopus oryzae)菌株AS 3.819基因组DNA中分别扩增得到了乳酸脱氢酶基因(ldhA)、丙酮酸脱氢酶基因(pdcA)、淀粉糖化酶基因(amyA)以及磷酸甘油酸酯激酶基因(pgk1)的启动子片段,并构建启动子探针载体pUKMR,以β-内酰胺酶基因(bla)为报告基因在大肠杆菌JM109中对这些启动子片段进行筛选及启动活性检测.结果表明:4种启动子片段成功启动报告基因表达;在非底物诱导情况下,ldhA和pgk1启动子启动活性较强;在有合适碳源底物诱导情况下pdcA和amyA启动子拥有更高的启动活性;ldhA基因的启动子启动活性随着启动子片段长度的增加有一定提高,而在长度为500 bp以上时,其启动活性变化不明显.本研究为Rhizopus oryzae提供了一种快速简便的启动子捕获分离及启动活性检测方法.
從L-乳痠生產菌米根黴(Rhizopus oryzae)菌株AS 3.819基因組DNA中分彆擴增得到瞭乳痠脫氫酶基因(ldhA)、丙酮痠脫氫酶基因(pdcA)、澱粉糖化酶基因(amyA)以及燐痠甘油痠酯激酶基因(pgk1)的啟動子片段,併構建啟動子探針載體pUKMR,以β-內酰胺酶基因(bla)為報告基因在大腸桿菌JM109中對這些啟動子片段進行篩選及啟動活性檢測.結果錶明:4種啟動子片段成功啟動報告基因錶達;在非底物誘導情況下,ldhA和pgk1啟動子啟動活性較彊;在有閤適碳源底物誘導情況下pdcA和amyA啟動子擁有更高的啟動活性;ldhA基因的啟動子啟動活性隨著啟動子片段長度的增加有一定提高,而在長度為500 bp以上時,其啟動活性變化不明顯.本研究為Rhizopus oryzae提供瞭一種快速簡便的啟動子捕穫分離及啟動活性檢測方法.
종L-유산생산균미근매(Rhizopus oryzae)균주AS 3.819기인조DNA중분별확증득도료유산탈경매기인(ldhA)、병동산탈경매기인(pdcA)、정분당화매기인(amyA)이급린산감유산지격매기인(pgk1)적계동자편단,병구건계동자탐침재체pUKMR,이β-내선알매기인(bla)위보고기인재대장간균JM109중대저사계동자편단진행사선급계동활성검측.결과표명:4충계동자편단성공계동보고기인표체;재비저물유도정황하,ldhA화pgk1계동자계동활성교강;재유합괄탄원저물유도정황하pdcA화amyA계동자옹유경고적계동활성;ldhA기인적계동자계동활성수착계동자편단장도적증가유일정제고,이재장도위500 bp이상시,기계동활성변화불명현.본연구위Rhizopus oryzae제공료일충쾌속간편적계동자포획분리급계동활성검측방법.
