分子诊断与治疗杂志
分子診斷與治療雜誌
분자진단여치료잡지
JOURNAL OF MOLECULAR DIAGNOSIS AND THERAPY
2015年
2期
103-106
,共4页
王昌富%彭长华%李琳芸%梅冰
王昌富%彭長華%李琳蕓%梅冰
왕창부%팽장화%리림예%매빙
糖皮质激素%个体化用药%质谱
糖皮質激素%箇體化用藥%質譜
당피질격소%개체화용약%질보
目的 建立可靠的糖皮质激素(GC)实验诊断系统平台. 方法 采用超高效液相色谱串联质谱法检测人工合成GC药物(泼尼松、甲基泼尼松和地塞米松)血药浓度,流式细胞分析法检测糖皮质激素受体(GR)-α蛋白,逆转录实时荧光基因扩增定量分析法检测GR-α mRNA,并进行了方法学分析. 结果 质谱法检测PNS、DPNS、DX血药浓度分别在l～15 ng/mL、1～100 ng/mL、20 ～ 400 ng/mL范围内线性关系良好.标本置26℃6h、置-20℃30 d、加甘油三酯13.21 mmol/L、加总胆红素162.8 μmol/L,比较各组血药浓度未发现统计学差异.PNS、DPNS、DX血药浓度日内CV分别小于10.81％、7.98％、5.47％,`间CV分别小于10.72％、6.29％、12.36％.回收率试验显示PNS、DPNS、DX在20 ng/mL、20 ng/mL、400 ng/mL浓度的平均回收率分别是99.91％、102.49％、109.89％.流式细胞术分析GR-α蛋白,标本立即处理检测与放置6h、24 h后处理检测结果比较无统计学差异,标本处理后5h检测结果无显著性变化,3种抗体反应条件(室温孵育30 min、37℃孵育30 min、4℃孵育6h)检测结果无统计学差异,百分率及荧光强度CV值分别为3.4％与9.8％.逆转录实时荧光基因扩增定量分析法检测GR-α mRNA检测灵敏度达到101 copies/μL,批内和批间Ct值变异系数均小于2.0％. 结论 初步证实本体系设计科学、方法先进、系统可靠.
目的 建立可靠的糖皮質激素(GC)實驗診斷繫統平檯. 方法 採用超高效液相色譜串聯質譜法檢測人工閤成GC藥物(潑尼鬆、甲基潑尼鬆和地塞米鬆)血藥濃度,流式細胞分析法檢測糖皮質激素受體(GR)-α蛋白,逆轉錄實時熒光基因擴增定量分析法檢測GR-α mRNA,併進行瞭方法學分析. 結果 質譜法檢測PNS、DPNS、DX血藥濃度分彆在l～15 ng/mL、1～100 ng/mL、20 ～ 400 ng/mL範圍內線性關繫良好.標本置26℃6h、置-20℃30 d、加甘油三酯13.21 mmol/L、加總膽紅素162.8 μmol/L,比較各組血藥濃度未髮現統計學差異.PNS、DPNS、DX血藥濃度日內CV分彆小于10.81％、7.98％、5.47％,`間CV分彆小于10.72％、6.29％、12.36％.迴收率試驗顯示PNS、DPNS、DX在20 ng/mL、20 ng/mL、400 ng/mL濃度的平均迴收率分彆是99.91％、102.49％、109.89％.流式細胞術分析GR-α蛋白,標本立即處理檢測與放置6h、24 h後處理檢測結果比較無統計學差異,標本處理後5h檢測結果無顯著性變化,3種抗體反應條件(室溫孵育30 min、37℃孵育30 min、4℃孵育6h)檢測結果無統計學差異,百分率及熒光彊度CV值分彆為3.4％與9.8％.逆轉錄實時熒光基因擴增定量分析法檢測GR-α mRNA檢測靈敏度達到101 copies/μL,批內和批間Ct值變異繫數均小于2.0％. 結論 初步證實本體繫設計科學、方法先進、繫統可靠.
목적 건립가고적당피질격소(GC)실험진단계통평태. 방법 채용초고효액상색보천련질보법검측인공합성GC약물(발니송、갑기발니송화지새미송)혈약농도,류식세포분석법검측당피질격소수체(GR)-α단백,역전록실시형광기인확증정량분석법검측GR-α mRNA,병진행료방법학분석. 결과 질보법검측PNS、DPNS、DX혈약농도분별재l～15 ng/mL、1～100 ng/mL、20 ～ 400 ng/mL범위내선성관계량호.표본치26℃6h、치-20℃30 d、가감유삼지13.21 mmol/L、가총담홍소162.8 μmol/L,비교각조혈약농도미발현통계학차이.PNS、DPNS、DX혈약농도일내CV분별소우10.81％、7.98％、5.47％,`간CV분별소우10.72％、6.29％、12.36％.회수솔시험현시PNS、DPNS、DX재20 ng/mL、20 ng/mL、400 ng/mL농도적평균회수솔분별시99.91％、102.49％、109.89％.류식세포술분석GR-α단백,표본립즉처리검측여방치6h、24 h후처리검측결과비교무통계학차이,표본처리후5h검측결과무현저성변화,3충항체반응조건(실온부육30 min、37℃부육30 min、4℃부육6h)검측결과무통계학차이,백분솔급형광강도CV치분별위3.4％여9.8％.역전록실시형광기인확증정량분석법검측GR-α mRNA검측령민도체도101 copies/μL,비내화비간Ct치변이계수균소우2.0％. 결론 초보증실본체계설계과학、방법선진、계통가고.
