肝胆胰外科杂志
肝膽胰外科雜誌
간담이외과잡지
JOURNAL OF HEPATOPANCREATOBILIARY SURGERY
2015年
2期
125-132
,共8页
周春光%段文彪%赵延荣%李仓%孙克龙%张谊%单云峰%张启瑜
週春光%段文彪%趙延榮%李倉%孫剋龍%張誼%單雲峰%張啟瑜
주춘광%단문표%조연영%리창%손극룡%장의%단운봉%장계유
肝星状细胞%脂肪间充质干细胞%内皮细胞%共培养%分化
肝星狀細胞%脂肪間充質榦細胞%內皮細胞%共培養%分化
간성상세포%지방간충질간세포%내피세포%공배양%분화
HSCs%rADSCs%ECs%co-culture%differentiation
目的 通过大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)与大鼠脂肪间充质干细胞(rat adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,rADSCs)在内皮细胞分化诱导培养基中的共培养,观察HSCs对rADSCs向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响.方法 共培养实验设置四组,阳性对照组、实验组、阴性对照组和空白对照组.诱导培养2周后,观察检测各组rADSCs向ECs的分化情况.结果 诱导2周后,三组rADSCs细胞体积逐渐变小变圆,部分细胞出现典型的内皮细胞鹅卵石样改变;四组细胞vWF、VE-Cadherin和表达均阳性;Western blotting检测结果与免疫荧光结果一致,实验组eNOS蛋白表达明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜ 0.05);内皮细胞迁移试验显示,实验组每视野下细胞迁移数目明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜ 0.01);低密度脂蛋白吞噬试验显示,实验组细胞吞噬DiI-Ac-LDL的能力明显高于空白对照组(P＜ 0.05);体外成血管试验显示实验组细胞体外成血管的能力明显高于其他三组细胞——阳性对照组(P＜ 0.05)、阴性对照组和空白对照组(P＜0.01).结论 HSCs与rADSCs的间接共培养可以促进大鼠血管内皮细胞生长因子(rat vascular endothelial growth factor,rVEGF)介导的rADSCs向ECs的分化,并增强分化后ECs的功能.利用共培养体系对多种细胞共培养时进行生长分化现象的观察及其相互影响机制的研究,可以为组织工程功能性血管化组织器官及其生物模拟物的设计和创造提供更加可靠的理论指导和更加广阔的研究策略.
目的 通過大鼠肝星狀細胞(hepatic stellate cells,HSCs)與大鼠脂肪間充質榦細胞(rat adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,rADSCs)在內皮細胞分化誘導培養基中的共培養,觀察HSCs對rADSCs嚮內皮細胞(endothelial cells,ECs)分化的影響.方法 共培養實驗設置四組,暘性對照組、實驗組、陰性對照組和空白對照組.誘導培養2週後,觀察檢測各組rADSCs嚮ECs的分化情況.結果 誘導2週後,三組rADSCs細胞體積逐漸變小變圓,部分細胞齣現典型的內皮細胞鵝卵石樣改變;四組細胞vWF、VE-Cadherin和錶達均暘性;Western blotting檢測結果與免疫熒光結果一緻,實驗組eNOS蛋白錶達明顯高于陰性對照組和空白對照組(P＜ 0.05);內皮細胞遷移試驗顯示,實驗組每視野下細胞遷移數目明顯高于陰性對照組和空白對照組(P＜ 0.01);低密度脂蛋白吞噬試驗顯示,實驗組細胞吞噬DiI-Ac-LDL的能力明顯高于空白對照組(P＜ 0.05);體外成血管試驗顯示實驗組細胞體外成血管的能力明顯高于其他三組細胞——暘性對照組(P＜ 0.05)、陰性對照組和空白對照組(P＜0.01).結論 HSCs與rADSCs的間接共培養可以促進大鼠血管內皮細胞生長因子(rat vascular endothelial growth factor,rVEGF)介導的rADSCs嚮ECs的分化,併增彊分化後ECs的功能.利用共培養體繫對多種細胞共培養時進行生長分化現象的觀察及其相互影響機製的研究,可以為組織工程功能性血管化組織器官及其生物模擬物的設計和創造提供更加可靠的理論指導和更加廣闊的研究策略.
목적 통과대서간성상세포(hepatic stellate cells,HSCs)여대서지방간충질간세포(rat adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,rADSCs)재내피세포분화유도배양기중적공배양,관찰HSCs대rADSCs향내피세포(endothelial cells,ECs)분화적영향.방법 공배양실험설치사조,양성대조조、실험조、음성대조조화공백대조조.유도배양2주후,관찰검측각조rADSCs향ECs적분화정황.결과 유도2주후,삼조rADSCs세포체적축점변소변원,부분세포출현전형적내피세포아란석양개변;사조세포vWF、VE-Cadherin화표체균양성;Western blotting검측결과여면역형광결과일치,실험조eNOS단백표체명현고우음성대조조화공백대조조(P＜ 0.05);내피세포천이시험현시,실험조매시야하세포천이수목명현고우음성대조조화공백대조조(P＜ 0.01);저밀도지단백탄서시험현시,실험조세포탄서DiI-Ac-LDL적능력명현고우공백대조조(P＜ 0.05);체외성혈관시험현시실험조세포체외성혈관적능력명현고우기타삼조세포——양성대조조(P＜ 0.05)、음성대조조화공백대조조(P＜0.01).결론 HSCs여rADSCs적간접공배양가이촉진대서혈관내피세포생장인자(rat vascular endothelial growth factor,rVEGF)개도적rADSCs향ECs적분화,병증강분화후ECs적공능.이용공배양체계대다충세포공배양시진행생장분화현상적관찰급기상호영향궤제적연구,가이위조직공정공능성혈관화조직기관급기생물모의물적설계화창조제공경가가고적이론지도화경가엄활적연구책략.
