植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2015年
2期
29-36
,共8页
张欢%刘洪娟%高艳玲%董天宇%赵奎军%樊东
張歡%劉洪娟%高豔玲%董天宇%趙奎軍%樊東
장환%류홍연%고염령%동천우%조규군%번동
苜蓿夜蛾%热休克蛋白90%克隆%表达
苜蓿夜蛾%熱休剋蛋白90%剋隆%錶達
목숙야아%열휴극단백90%극륭%표체
Heliothis viriplaca%heat shock protein 90%cloning%expression
热体克蛋白(heat shock proteins,HSPs)是生物体适应外界不良环境条件的关键蛋白.热休克蛋白90(HSP90)是HSP家族的重要成员.本试验以苜蓿夜蛾为材料提取虫体总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到hsp90基因全长cDNA序列,命名为Hvhsp90(GenBank登录号KF636495).该序列含有2 472个碱基,包括一个2 154个碱基的开放阅读框,编码一个含717个氨基酸的蛋白,分子量约为82.5 ku,等电点为4.97,且含有5个标签序列及胞质特征序列MEEVD,推导的氨基酸序列与鳞翅目其他昆虫HSP90相似性85％～99％之间.RT-PCR结果表明,该基因在苜蓿夜蛾不同发育时期和不同组织均有mRNA水平的特异性表达.该基因在大肠杆菌表达系统中进行了诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,HvHSP90能够高效表达,并与预测的融合蛋白分子量相符.
熱體剋蛋白(heat shock proteins,HSPs)是生物體適應外界不良環境條件的關鍵蛋白.熱休剋蛋白90(HSP90)是HSP傢族的重要成員.本試驗以苜蓿夜蛾為材料提取蟲體總RNA,利用RT-PCR和RACE技術,擴增得到hsp90基因全長cDNA序列,命名為Hvhsp90(GenBank登錄號KF636495).該序列含有2 472箇堿基,包括一箇2 154箇堿基的開放閱讀框,編碼一箇含717箇氨基痠的蛋白,分子量約為82.5 ku,等電點為4.97,且含有5箇標籤序列及胞質特徵序列MEEVD,推導的氨基痠序列與鱗翅目其他昆蟲HSP90相似性85％～99％之間.RT-PCR結果錶明,該基因在苜蓿夜蛾不同髮育時期和不同組織均有mRNA水平的特異性錶達.該基因在大腸桿菌錶達繫統中進行瞭誘導錶達,經SDS-PAGE和Western blot檢測結果錶明,HvHSP90能夠高效錶達,併與預測的融閤蛋白分子量相符.
열체극단백(heat shock proteins,HSPs)시생물체괄응외계불량배경조건적관건단백.열휴극단백90(HSP90)시HSP가족적중요성원.본시험이목숙야아위재료제취충체총RNA,이용RT-PCR화RACE기술,확증득도hsp90기인전장cDNA서렬,명명위Hvhsp90(GenBank등록호KF636495).해서렬함유2 472개감기,포괄일개2 154개감기적개방열독광,편마일개함717개안기산적단백,분자량약위82.5 ku,등전점위4.97,차함유5개표첨서렬급포질특정서렬MEEVD,추도적안기산서렬여린시목기타곤충HSP90상사성85％～99％지간.RT-PCR결과표명,해기인재목숙야아불동발육시기화불동조직균유mRNA수평적특이성표체.해기인재대장간균표체계통중진행료유도표체,경SDS-PAGE화Western blot검측결과표명,HvHSP90능구고효표체,병여예측적융합단백분자량상부.
