中国兽药杂志
中國獸藥雜誌
중국수약잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY DRUG
2015年
4期
7-11
,共5页
徐微%李启红%李岭%孙淼%李俊平%杨承槐%李慧姣
徐微%李啟紅%李嶺%孫淼%李俊平%楊承槐%李慧姣
서미%리계홍%리령%손묘%리준평%양승괴%리혜교
鸡传染性贫血病毒%杆状病毒表达%VP1%VP2%免疫原性
鷄傳染性貧血病毒%桿狀病毒錶達%VP1%VP2%免疫原性
계전염성빈혈병독%간상병독표체%VP1%VP2%면역원성
chicken anemia virus%baculovirus expression%VP1%VP2%immunogenicity
为探索鸡传染性贫血重组蛋白亚单位疫苗的可行性，将鸡传染性贫血病毒基因分别克隆到转移载体pFastBacHTA中，再将其分别转化DH10Bac感受态细胞得到相应的重组表达载体，转染昆虫细胞Sf21获得含有VP1、VP2基因的重组杆状病毒vBac－VP1、vBac－VP2，应用悬浮培养的Sf21细胞表达重组蛋白。 SDS－PAGE及Western blotting结果证明， VP1、VP2基因在昆虫细胞中得到了表达，动物试验进一步证实，重组蛋白免疫SPF鸡可产生ELISA抗体，提示杆状病毒表达的VP 1、VP 2具有良好的免疫原性。
為探索鷄傳染性貧血重組蛋白亞單位疫苗的可行性，將鷄傳染性貧血病毒基因分彆剋隆到轉移載體pFastBacHTA中，再將其分彆轉化DH10Bac感受態細胞得到相應的重組錶達載體，轉染昆蟲細胞Sf21穫得含有VP1、VP2基因的重組桿狀病毒vBac－VP1、vBac－VP2，應用懸浮培養的Sf21細胞錶達重組蛋白。 SDS－PAGE及Western blotting結果證明， VP1、VP2基因在昆蟲細胞中得到瞭錶達，動物試驗進一步證實，重組蛋白免疫SPF鷄可產生ELISA抗體，提示桿狀病毒錶達的VP 1、VP 2具有良好的免疫原性。
위탐색계전염성빈혈중조단백아단위역묘적가행성，장계전염성빈혈병독기인분별극륭도전이재체pFastBacHTA중，재장기분별전화DH10Bac감수태세포득도상응적중조표체재체，전염곤충세포Sf21획득함유VP1、VP2기인적중조간상병독vBac－VP1、vBac－VP2，응용현부배양적Sf21세포표체중조단백。 SDS－PAGE급Western blotting결과증명， VP1、VP2기인재곤충세포중득도료표체，동물시험진일보증실，중조단백면역SPF계가산생ELISA항체，제시간상병독표체적VP 1、VP 2구유량호적면역원성。
The VP1 and VP2 genes of chicken anemia virus were cloned into pFastBacHTA vectors separately, then transformed into competent cells of E. coli DH10Bac. The recombinant baculoviruses vBac-VP1 and vBac-VP2were generated by transfection of recombinant bacmid into Sf21 insect cells. Finally, recombinant proteins were expressed in suspension culture Sf21 cells. SDS-PAGE and Western blotting showed that VP1 and VP2 have been expressed in Sf21 cells. Immunized the SPF chicken with recombinant protein, their serum were inspected by ELISA and showed good immunogenicity.
