畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
4期
32-35
,共4页
张福全%丛姗%温世勇%郭继彤%曹贵方
張福全%叢姍%溫世勇%郭繼彤%曹貴方
장복전%총산%온세용%곽계동%조귀방
马%羊膜%上皮干细胞%TrypLE%鉴定
馬%羊膜%上皮榦細胞%TrypLE%鑒定
마%양막%상피간세포%TrypLE%감정
equine%amniotic membrane%epithelial stem cells%TrypLE
通过TrypLE消化马羊膜收集羊膜上皮细胞,经过传代培养后,用免疫荧光染色、RT-PCR及流式细胞技术(FACS)分析其干细胞特征.免疫荧光染色发现马羊膜上皮细胞表达SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81,只有少量的半贴壁细胞表达Oct4;RT-PCR进一步证实马羊膜上皮细胞表达Oct4、Nanog和Sox2,而不表达STAT-3;流式细胞技术分析显示马羊膜上皮细胞也表达CD44、CD90、CD105,但不表达CD45.马羊膜上皮细胞培养三代时,平均倍增时间为(1.25±0.17)d.研究结果表明,通过TrypLE消化马羊膜上皮可以分离获得马羊膜上皮细胞.
通過TrypLE消化馬羊膜收集羊膜上皮細胞,經過傳代培養後,用免疫熒光染色、RT-PCR及流式細胞技術(FACS)分析其榦細胞特徵.免疫熒光染色髮現馬羊膜上皮細胞錶達SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81,隻有少量的半貼壁細胞錶達Oct4;RT-PCR進一步證實馬羊膜上皮細胞錶達Oct4、Nanog和Sox2,而不錶達STAT-3;流式細胞技術分析顯示馬羊膜上皮細胞也錶達CD44、CD90、CD105,但不錶達CD45.馬羊膜上皮細胞培養三代時,平均倍增時間為(1.25±0.17)d.研究結果錶明,通過TrypLE消化馬羊膜上皮可以分離穫得馬羊膜上皮細胞.
통과TrypLE소화마양막수집양막상피세포,경과전대배양후,용면역형광염색、RT-PCR급류식세포기술(FACS)분석기간세포특정.면역형광염색발현마양막상피세포표체SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60화TRA-1-81,지유소량적반첩벽세포표체Oct4;RT-PCR진일보증실마양막상피세포표체Oct4、Nanog화Sox2,이불표체STAT-3;류식세포기술분석현시마양막상피세포야표체CD44、CD90、CD105,단불표체CD45.마양막상피세포배양삼대시,평균배증시간위(1.25±0.17)d.연구결과표명,통과TrypLE소화마양막상피가이분리획득마양막상피세포.
