湖南师范大学学报（医学版）
湖南師範大學學報（醫學版）
호남사범대학학보（의학판）
JOURNAL OF HUNAN NORMAL UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2014年
1期
45-47
,共3页
HNF4α基因%肝星状细胞
HNF4α基因%肝星狀細胞
HNF4α기인%간성상세포
HNF4 gene%HSC
目的:通过干扰RNA技术静息HNF4α基因表达以了解其对肝星状细胞生物学表型的影响.方法:设计合成一对能稳定表达针对HNF4αmRNA起始编码区寡核苷酸,其两端带有限制性酶切位点,表达后可形成发夹结构,然后将这一双链寡核苷酸与重组腺相关病毒载体(rAAV)连接,构建重组体rAAV-siRNA.将重组体rAAV-siRNA加入培养增殖良好的HSC细胞中孵育,然后分别检测基因和蛋白水平HNF4α的表达,并测定其上皮细胞标志物E-cadherin和间质细胞标志物Vimentin的变化;同时观察HSC的表型变化.结果:重组体rAAV-siRNA实验组HSCHNF4α表达明显下调,Vimentin表达增加,E-cadherin减少,细胞表型成梭型改变.结论:HNF4α基因的下调可导致HSC向间质细胞发展,说明HNF4α在肝纤维化复杂的EMT基因调控网络中起重要的作用.
目的:通過榦擾RNA技術靜息HNF4α基因錶達以瞭解其對肝星狀細胞生物學錶型的影響.方法:設計閤成一對能穩定錶達針對HNF4αmRNA起始編碼區寡覈苷痠,其兩耑帶有限製性酶切位點,錶達後可形成髮夾結構,然後將這一雙鏈寡覈苷痠與重組腺相關病毒載體(rAAV)連接,構建重組體rAAV-siRNA.將重組體rAAV-siRNA加入培養增殖良好的HSC細胞中孵育,然後分彆檢測基因和蛋白水平HNF4α的錶達,併測定其上皮細胞標誌物E-cadherin和間質細胞標誌物Vimentin的變化;同時觀察HSC的錶型變化.結果:重組體rAAV-siRNA實驗組HSCHNF4α錶達明顯下調,Vimentin錶達增加,E-cadherin減少,細胞錶型成梭型改變.結論:HNF4α基因的下調可導緻HSC嚮間質細胞髮展,說明HNF4α在肝纖維化複雜的EMT基因調控網絡中起重要的作用.
목적:통과간우RNA기술정식HNF4α기인표체이료해기대간성상세포생물학표형적영향.방법:설계합성일대능은정표체침대HNF4αmRNA기시편마구과핵감산,기량단대유한제성매절위점,표체후가형성발협결구,연후장저일쌍련과핵감산여중조선상관병독재체(rAAV)련접,구건중조체rAAV-siRNA.장중조체rAAV-siRNA가입배양증식량호적HSC세포중부육,연후분별검측기인화단백수평HNF4α적표체,병측정기상피세포표지물E-cadherin화간질세포표지물Vimentin적변화;동시관찰HSC적표형변화.결과:중조체rAAV-siRNA실험조HSCHNF4α표체명현하조,Vimentin표체증가,E-cadherin감소,세포표형성사형개변.결론:HNF4α기인적하조가도치HSC향간질세포발전,설명HNF4α재간섬유화복잡적EMT기인조공망락중기중요적작용.
