安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
11期
20-23
,共4页
罗志萍%肖武汉%黄迎波%周慧平%袁晓芬%王华全
囉誌萍%肖武漢%黃迎波%週慧平%袁曉芬%王華全
라지평%초무한%황영파%주혜평%원효분%왕화전
斑点叉尾鮰%物种鉴定%线粒体DNA
斑點扠尾鮰%物種鑒定%線粒體DNA
반점차미회%물충감정%선립체DNA
Ictalurus punctatus%Channel catfish%Speieces identification%Mitochondrial DNA sequence
[目的]应对出口水产品国外技术贸易壁垒,建立一种能被国际上普遍接受的进出口水产品中斑点叉尾鮰物种真伪鉴定方法,该方法也有助于我国水产品行业商业欺诈认定裁决工作.[方法]采用酚-氯仿抽提法提取水产品中基因组DNA,利用自行设计的引物D-loopF/D-loopR,对斑点叉尾鮰及大口鲇、革胡子鲶、鲤和鲫等物种的线粒体DNA D-loop和COI区进行PCR扩增测序比对,根据斑点叉尾鮰物种D-loop区的序列寻找其特异性酶切位点,对D-loop区进行酶切鉴定.[结果]]建立的DNA提取技术可以满足水产品中线粒体D-loop扩增的要求,斑点叉尾鮰D-loop对应的最佳退火温度为54.8℃,其在D-loop序列的200 bp处有一特异性酶切位点EcoRI.[结论]建立的斑点叉尾鮰产品中DNA提取、扩增技术及EcoRI特异性酶切图谱方法,不需测序就能够将斑点叉尾鮰与其他近似物种区分开来,该方法适于进出口水产品贸易中斑点叉尾鮰产品的物种真伪鉴定.
[目的]應對齣口水產品國外技術貿易壁壘,建立一種能被國際上普遍接受的進齣口水產品中斑點扠尾鮰物種真偽鑒定方法,該方法也有助于我國水產品行業商業欺詐認定裁決工作.[方法]採用酚-氯倣抽提法提取水產品中基因組DNA,利用自行設計的引物D-loopF/D-loopR,對斑點扠尾鮰及大口鲇、革鬍子鯰、鯉和鯽等物種的線粒體DNA D-loop和COI區進行PCR擴增測序比對,根據斑點扠尾鮰物種D-loop區的序列尋找其特異性酶切位點,對D-loop區進行酶切鑒定.[結果]]建立的DNA提取技術可以滿足水產品中線粒體D-loop擴增的要求,斑點扠尾鮰D-loop對應的最佳退火溫度為54.8℃,其在D-loop序列的200 bp處有一特異性酶切位點EcoRI.[結論]建立的斑點扠尾鮰產品中DNA提取、擴增技術及EcoRI特異性酶切圖譜方法,不需測序就能夠將斑點扠尾鮰與其他近似物種區分開來,該方法適于進齣口水產品貿易中斑點扠尾鮰產品的物種真偽鑒定.
[목적]응대출구수산품국외기술무역벽루,건립일충능피국제상보편접수적진출구수산품중반점차미회물충진위감정방법,해방법야유조우아국수산품행업상업기사인정재결공작.[방법]채용분-록방추제법제취수산품중기인조DNA,이용자행설계적인물D-loopF/D-loopR,대반점차미회급대구점、혁호자염、리화즉등물충적선립체DNA D-loop화COI구진행PCR확증측서비대,근거반점차미회물충D-loop구적서렬심조기특이성매절위점,대D-loop구진행매절감정.[결과]]건립적DNA제취기술가이만족수산품중선립체D-loop확증적요구,반점차미회D-loop대응적최가퇴화온도위54.8℃,기재D-loop서렬적200 bp처유일특이성매절위점EcoRI.[결론]건립적반점차미회산품중DNA제취、확증기술급EcoRI특이성매절도보방법,불수측서취능구장반점차미회여기타근사물충구분개래,해방법괄우진출구수산품무역중반점차미회산품적물충진위감정.
