西南民族大学学报（自然科学版）
西南民族大學學報（自然科學版）
서남민족대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTHWEST NATIONALITIES COLLEGE·NATURAL SCIENCE EDITION
2015年
2期
144-149
,共6页
猪表皮生长因子%亚克隆%诱导表达
豬錶皮生長因子%亞剋隆%誘導錶達
저표피생장인자%아극륭%유도표체
根据GenBank中猪表皮生长因子(pEGF)基因信息设计引物,通过PCR、亚克隆、基因重组等技术,构建得到pEGF拷贝数分别为1、2、3的原核重组表达质粒.用重组质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblotting分析结果表明,在37℃诱导条件下,1、2、3拷贝pEGF重组质粒均能表达pEGF蛋白,灰度值分析表明:表达的融合蛋白占菌体蛋白总量分别为9.54％、20.37％、26.79％,表明在原核表达中,对pEGF进行同向串联,增加其拷贝数,可以提高pEGF在表达后融合蛋白中所占比例,相应提高pEGF蛋白产量.本研究为pEGF重组蛋白的高效表达和批量生产提供可靠的依据.
根據GenBank中豬錶皮生長因子(pEGF)基因信息設計引物,通過PCR、亞剋隆、基因重組等技術,構建得到pEGF拷貝數分彆為1、2、3的原覈重組錶達質粒.用重組質粒轉化E.coli BL21,IPTG誘導錶達,SDS-PAGE和Westernblotting分析結果錶明,在37℃誘導條件下,1、2、3拷貝pEGF重組質粒均能錶達pEGF蛋白,灰度值分析錶明:錶達的融閤蛋白佔菌體蛋白總量分彆為9.54％、20.37％、26.79％,錶明在原覈錶達中,對pEGF進行同嚮串聯,增加其拷貝數,可以提高pEGF在錶達後融閤蛋白中所佔比例,相應提高pEGF蛋白產量.本研究為pEGF重組蛋白的高效錶達和批量生產提供可靠的依據.
근거GenBank중저표피생장인자(pEGF)기인신식설계인물,통과PCR、아극륭、기인중조등기술,구건득도pEGF고패수분별위1、2、3적원핵중조표체질립.용중조질립전화E.coli BL21,IPTG유도표체,SDS-PAGE화Westernblotting분석결과표명,재37℃유도조건하,1、2、3고패pEGF중조질립균능표체pEGF단백,회도치분석표명:표체적융합단백점균체단백총량분별위9.54％、20.37％、26.79％,표명재원핵표체중,대pEGF진행동향천련,증가기고패수,가이제고pEGF재표체후융합단백중소점비례,상응제고pEGF단백산량.본연구위pEGF중조단백적고효표체화비량생산제공가고적의거.
