云南农业大学学报（自然科学）
雲南農業大學學報（自然科學）
운남농업대학학보（자연과학）
Journal of Yunnan Agricultural University
2015年
2期
167-172
,共6页
施美辰%木万福%万琼莲%王连春%蔡红%陈海如
施美辰%木萬福%萬瓊蓮%王連春%蔡紅%陳海如
시미신%목만복%만경련%왕련춘%채홍%진해여
莴苣丛枝植原体%Imp基因%抗原表位%原核表达
萵苣叢枝植原體%Imp基因%抗原錶位%原覈錶達
와거총지식원체%Imp기인%항원표위%원핵표체
lettuce witches'-broom phytoplasma%Imp gene%epitope%prokaryotic expression
采用PCR方法,从采自云南元谋地区的莴苣丛枝植株总DNA中扩增到植原体免疫膜蛋白Imp基因,并进行抗原表位分析和原核表达.结果表明,莴苣丛枝植原体免疫膜蛋白Imp基因长519 bp,编码一个包括172个氨基酸的蛋白.蛋白分子量为19 ku,理论等电点为8.61,在N-末端有一个明显的跨膜区,不存在信号肽切割位点.抗原表位分析认为,该蛋白氨基酸的第62～ 83,95～113,133～145区段为该蛋白最可能的蛋白表位区.通过构建原核表达载体pET30a-lmp,转入宿主菌BL21(DE3)-plysS中,经IPTG诱导表达出约25 ku的融合蛋白.
採用PCR方法,從採自雲南元謀地區的萵苣叢枝植株總DNA中擴增到植原體免疫膜蛋白Imp基因,併進行抗原錶位分析和原覈錶達.結果錶明,萵苣叢枝植原體免疫膜蛋白Imp基因長519 bp,編碼一箇包括172箇氨基痠的蛋白.蛋白分子量為19 ku,理論等電點為8.61,在N-末耑有一箇明顯的跨膜區,不存在信號肽切割位點.抗原錶位分析認為,該蛋白氨基痠的第62～ 83,95～113,133～145區段為該蛋白最可能的蛋白錶位區.通過構建原覈錶達載體pET30a-lmp,轉入宿主菌BL21(DE3)-plysS中,經IPTG誘導錶達齣約25 ku的融閤蛋白.
채용PCR방법,종채자운남원모지구적와거총지식주총DNA중확증도식원체면역막단백Imp기인,병진행항원표위분석화원핵표체.결과표명,와거총지식원체면역막단백Imp기인장519 bp,편마일개포괄172개안기산적단백.단백분자량위19 ku,이론등전점위8.61,재N-말단유일개명현적과막구,불존재신호태절할위점.항원표위분석인위,해단백안기산적제62～ 83,95～113,133～145구단위해단백최가능적단백표위구.통과구건원핵표체재체pET30a-lmp,전입숙주균BL21(DE3)-plysS중,경IPTG유도표체출약25 ku적융합단백.
