浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2015年
1期
44-55
,共12页
吕晓菡%方献平%柴伟国%马俊平%周毅飞
呂曉菡%方獻平%柴偉國%馬俊平%週毅飛
려효함%방헌평%시위국%마준평%주의비
辣椒%细胞质雄性不育%花药%细胞学%蛋白质组学
辣椒%細胞質雄性不育%花藥%細胞學%蛋白質組學
랄초%세포질웅성불육%화약%세포학%단백질조학
pepper%cytoplasmic male sterile%anther%cytology%proteomics
为了解辣椒胞质雄性不育系与保持系花药的细胞学和蛋白质组学差异,以辣椒胞质不育系和保持系花蕾发育的6个不同时期的花药为材料,以石蜡切片于Leica DM1000显微镜下观察其发育过程的差异.然后利用SDS-PAGE进行花药蛋白分离,经LC-MS/MS质谱技术和蛋白质组学分析对差异蛋白质条带进行鉴定.结果显示:花粉败育发生在四分体形成以后,与绒毡层细胞的过度液泡化及四分体周围的胼胝质不能解体有关.另外,与辣椒保持系相比,在不育系花药蛋白中有4条差异蛋白质条带(条带1～4)表达量下调,质谱分析后共鉴定出蛋白质68个,其中不重复蛋白质64个.对质谱数据利用UniProt数据库进行搜索鉴定,鉴定出的蛋白质按分子功能归类,涉及催化作用的蛋白质最多有24个;按细胞组分归类,涉及细胞内膜组织的最多有20个.按生物学过程归类,参与代谢过程的最多有24个.这说明在四分体形成以后,胞质雄性不育系花药的物质和能量代谢出现异常,导致绒毡层异常膨大,四分体不能获得物质和能量从而败育.另外,这也充分说明本研究通过蛋白质组学分析鉴定出的差异蛋白质可初步解释胞质雄性不育系与保持系在细胞学上的差异表现.
為瞭解辣椒胞質雄性不育繫與保持繫花藥的細胞學和蛋白質組學差異,以辣椒胞質不育繫和保持繫花蕾髮育的6箇不同時期的花藥為材料,以石蠟切片于Leica DM1000顯微鏡下觀察其髮育過程的差異.然後利用SDS-PAGE進行花藥蛋白分離,經LC-MS/MS質譜技術和蛋白質組學分析對差異蛋白質條帶進行鑒定.結果顯示:花粉敗育髮生在四分體形成以後,與絨氈層細胞的過度液泡化及四分體週圍的胼胝質不能解體有關.另外,與辣椒保持繫相比,在不育繫花藥蛋白中有4條差異蛋白質條帶(條帶1～4)錶達量下調,質譜分析後共鑒定齣蛋白質68箇,其中不重複蛋白質64箇.對質譜數據利用UniProt數據庫進行搜索鑒定,鑒定齣的蛋白質按分子功能歸類,涉及催化作用的蛋白質最多有24箇;按細胞組分歸類,涉及細胞內膜組織的最多有20箇.按生物學過程歸類,參與代謝過程的最多有24箇.這說明在四分體形成以後,胞質雄性不育繫花藥的物質和能量代謝齣現異常,導緻絨氈層異常膨大,四分體不能穫得物質和能量從而敗育.另外,這也充分說明本研究通過蛋白質組學分析鑒定齣的差異蛋白質可初步解釋胞質雄性不育繫與保持繫在細胞學上的差異錶現.
위료해랄초포질웅성불육계여보지계화약적세포학화단백질조학차이,이랄초포질불육계화보지계화뢰발육적6개불동시기적화약위재료,이석사절편우Leica DM1000현미경하관찰기발육과정적차이.연후이용SDS-PAGE진행화약단백분리,경LC-MS/MS질보기술화단백질조학분석대차이단백질조대진행감정.결과현시:화분패육발생재사분체형성이후,여융전층세포적과도액포화급사분체주위적변지질불능해체유관.령외,여랄초보지계상비,재불육계화약단백중유4조차이단백질조대(조대1～4)표체량하조,질보분석후공감정출단백질68개,기중불중복단백질64개.대질보수거이용UniProt수거고진행수색감정,감정출적단백질안분자공능귀류,섭급최화작용적단백질최다유24개;안세포조분귀류,섭급세포내막조직적최다유20개.안생물학과정귀류,삼여대사과정적최다유24개.저설명재사분체형성이후,포질웅성불육계화약적물질화능량대사출현이상,도치융전층이상팽대,사분체불능획득물질화능량종이패육.령외,저야충분설명본연구통과단백질조학분석감정출적차이단백질가초보해석포질웅성불육계여보지계재세포학상적차이표현.
